0
Twój koszyk jest pusty...
0
Porównywać
Dodaj produkty do porównania za pomocą ikony wagi, a następnie porównaj ich parametry.
Chromatografia
Agilent GC AS syringes with fixed needles
| Objętość [ µl] | Długość igły [ mm ] | Średnica igły | Zakończenie igły | Gazoszczelny |
|---|---|---|---|---|
| 5 | 42 | 26 | Stożek | × |
| 5 | 42 | 23 | Stożek | × |
| 5 | 42 | 23-26 | Stożek | × |
| 10 | 42 | 26 | Stożek | × |
| 10 | 42 | 23 | Stożek | × |
| 10 | 42 | 23 | Stożek | tak |
| 10 | 42 | 23-26 | Stożek | × |
| 10 | 42 | 23-26 | Stożek | tak |
| 25 | 42 | 23-26 | Stożek | tak |
| 50 | 42 | 23-26 | Stożek | tak |
| 100 | 42 | 23-26 | Stożek | tak |
Przegląd oficjalnych metod wykorzystujących kolumny immunopowinowactwa
Lista oficjalnych metod wykorzystujących pola VICAM o powinowactwie immunologicznym
| Oficjalna metoda | Mikotoksyna | Data wydania | Metoda |
|---|---|---|---|
| EN - 12955 | Aflatoksyna | Lipiec 1999 | Środki spożywcze - Oznaczanie aflatoksyny B1 i suma aflatoksyn B1, B2, G1 i G2 w zbożach, muszlach i produktach pochodnych - Wysokosprawna metoda chromatografii cieczowej z derywatyzacją po kolumnie i oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego |
| EN - 14123 | Aflatoksyna | Styczeń 2008 | Środki spożywcze - Oznaczanie aflatoksyny B1 i sumy aflatoksyn B1, B2, G1 i G2 w orzechach laskowych, orzeszkach ziemnych, przetokach, figach i paprykach w proszku - Metoda wysokosprawnej chromatografii cieczowej z derywatyzacją po kolumnie i oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego |
| EN - 14132 | Ochratoksyna A | 2009 | Środki spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w jęczmieniu i prażonej kawie - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego |
| EN - 14133 | Ochratoksyna A | Lipiec 2003 | Środki spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w winie i piwie - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego |
| EN - 14352 | Fumonisin | Lipiec 2004 | Foods - Oznaczanie fumonizyny B1 i B2 w żywności na bazie kukurydzy - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego |
| EN ISO 14501 | Aflatoksyna | 2007 | Mleko i mleko w proszku - Oznaczanie zawartości aflatoksyny M1 - Oznaczanie metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej |
| EN - 15829 | Ochratoksyna A | 2010 | Artykuły spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w porzeczkach, rodzynkach, sułtankach, suszonych owocach i suszonych figach. Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny immunologicznej i wykrywaniem fluorescencji |
| EN - 15835 | Ochratoksyna A | 2010 | Artykuły spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w żywności na bazie zbóż dla niemowląt i małych dzieci. Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny immunologicznej i wykrywaniem fluorescencji |
Rx-35sil MS
Rxi® - kapilarne kolumny GC 
Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.
Zalety kolumn Rxi®
- Ultra-niskie krwawienie
- Wyjątkowa bezwładność
- Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami
Aplikacje
- Pestycydy chloroorganiczne
- Kongenery PCB i mieszaniny Aroclor
- Herbicydy
- Preparaty farmaceutyczne
- Sterole
- Estry ftalanów
| ID (mm) | df (μm) | Granice wartości progowych (° C) |
|---|---|---|
| 0,25 | 0,25 | 50 do 340/360 |
| 0,32 | 0,25 | 50 do 340/360 |
| 0,53 | 0,50 | 50 do 320/340 |
Rxi-624Sil MS
Rxi® - kapilarne kolumny GC
Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.
Zalety kolumn Rxi®
- Ultra-niskie krwawienie
- Wyjątkowa bezwładność
- Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami
Faza stacjonarna Rxi®-624Sil MS
- Wyróżniają się kształtem szczytów wielu związków, zarówno kwasowych, jak i zasadowych
- Wysoka selektywność w przypadku unieszkodliwiania resztkowego rozpuszczalnika, USP 467 Medium Bronze Wheel
Aplikacje
- Resztkowe rozpuszczalniki
| ID (mm) | df (μm) | Granice wartości progowych (° C) |
|---|---|---|
| 0,18 | 1,00 | -60 do 300/320 |
| 0,25 | 1,40 | -60 do 300/320 |
| 0,32 | 1,80 | -60 do 300/320 |
| 0,53 | 3,00 | -60 do 280/300 |
Rx-5 HT
Rxi® - kapilarne kolumny GC
Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.
Zalety kolumn Rxi®
- Ultra-niskie krwawienie
- Wyjątkowa bezwładność
- Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami
Aplikacje
- Analiza olejów silnikowych i wrzących paliw
- Polimery
- Woski
- Metody podobnej destylacji
- Długołańcuchowe węglowodory
- Trójglicerydy
| ID (mm) | df (μm) | Ograniczenia temperatury * (° C) |
|---|---|---|
| 0,25 | 0.10 | -60 do 400 |
| 0,25 | 0,25 | -60 do 400 |
| 0,32 | 0.10 | -60 do 400 |
| 0,32 | 0,25 | -60 do 400 |
| 0,53 | 0,15 | -60 do 400 |
* Max. temperatura wynosi do 430 ° C, ale żywotność kolumn zostanie zmniejszona.
Konwersja wielkości cząstek
| Rozmiar w MESH | Rozmiar w μm | Rozmiar w calach |
|---|---|---|
| 40 | 420 | 0,0165 |
| 45 | 354 | 0,0139 |
| 50 | 297 | 0,0117 |
| 60 | 250 | 0,0098 |
| 70 | 210 | 0,0083 |
| 80 | 177 | 0,0070 |
| 100 | 149 | 0,0059 |
| 120 | 125 | 0,0049 |
| 140 | 105 | 0,0041 |
| 170 | 88 | 0,0035 |
| 200 | 74 | 0,0029 |
| 230 | 63 | 0,0025 |
| 270 | 53 | 0,0021 |
| 325 | 44 | 0,0017 |
| 400 | 37 | 0,0015 |
HPLC troubleshooting
Nieprawidłowe ciśnienie
Brak odczytu ciśnienia, brak przepływu
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Wyłącz zasilanie | Włącz zasilanie |
| Przepalony bezpiecznik | Wymień bezpiecznik |
| Ustawienie lub awaria sterownika | Sprawdź prawidłowe ustawienia, napraw lub wymień sterownik |
| Zepsuty tłok | Wymień tłok |
| Powietrze uwięzione w głowicy pompy | Faza ruchoma odgazowania, odpowietrzenie pompy i pompy zalewania |
| Niewystarczająca faza ruchoma | Uzupełnij zbiornik, wymień frytę wlotową, jeśli jest zablokowana |
| Wadliwe zawory zwrotne | Wymień zawory zwrotne |
| Poważny wyciek | Dokręć lub wymień złączki |
Teraz odczyt ciśnienia, przepływ jest normalny
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Wadliwy licznik | Wymień miernik |
| Wadliwy przetwornik ciśnienia | Wymień przetwornik |
Wysokie ciśnienie wsteczne
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zbyt wysokie natężenie przepływu | Dostosuj ustawienia |
| Zablokowana fryta kolumnowa | Kolumnę z płukaniem wstecznym, jeśli jest to dozwolone, wymień frytę zgodnie z instrukcjami producenta i warunkami gwarancji lub wymień kolumnę |
| Niewłaściwa faza ruchoma, wytrącony bufor | Stosować prawidłową fazę ruchomą, przemyć kolumnę |
| Niewłaściwa kolumna | Użyj odpowiedniej kolumny |
| Blokada wtryskiwacza | Usuń blokadę lub wymień wtryskiwacz |
| Zbyt niska temperatura kolumny | Podnieś temperaturę |
| Awaria kontrolera | Napraw lub wymień kontroler |
| Zablokowana kolumna ochronna | Usuń/wymień kolumnę ochronną |
| Zablokowany filtr liniowy | Usuń/wymień filtr wbudowany |
Powinieneś dowiedzieć się, co spowodowało wysokie ciśnienie wsteczne - kolumna czy system? Zalecamy następującą procedurę:
Wyjmij kolumnę z systemu i włącz pompę. Jeśli wysokie ciśnienie wsteczne nadal występuje, oznacza to, że w systemie jest blokada:
- zablokowane lub zaciśnięte przewody
- brudna fryta pompy
- lub zatkany zawór wtryskowy
Jeśli ciśnienie jest normalne, występuje problem z kolumną:
- zatkany lub uszkodzony filtr kolumny wstępnej, kolumny ochronnej lub fryty
- wytrącanie próbki lub buforu w kolumnie
Niskie ciśnienie wsteczne
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zbyt niski przepływ | Dostosuj natężenie przepływu |
| Wyciek w systemie | Zlokalizuj i popraw |
| Niewłaściwa kolumna | Użyj odpowiedniej kolumny |
| Za wysoka temperatura kolumny | Niższa temperatura |
| Awaria kontrolera | Napraw lub wymień kontroler |
Zmienne ciśnienie
Patrz rozdział Wysokie przeciwciśnienie .
Ciśnienie spada do zera
Patrz sekcje Brak odczytu ciśnienia, brak przepływu i Brak odczytu ciśnienia, przepływ jest normalny
Spadek ciśnienia, ale nie do zera
Patrz rozdział Niskie ciśnienie
Cykliczne ciśnienie
| Możliwy przypadek | Rozwiązanie |
|---|---|
| Powietrze w pompie | Odgazuj rozpuszczalnik i/lub spuść powietrze z pompy |
| Wadliwy zawór(-y) zwrotny(-e) | Wymień zawory zwrotne |
| Awaria uszczelki pompy | Wymień uszczelkę pompy |
| Niewystarczające odgazowanie | Odgazuj rozpuszczalnik i/lub zmień metody odgazowania (np. użyj odgazowywacza próżniowego) |
| Wyciek w systemie | Zlokalizuj wyciek i napraw go |
| Korzystanie z elucji gradientowej | Cykliczne zmiany ciśnienia są normalne ze względu na zmianę lepkości |
Wycieki
Wycieki są zwykle zatrzymywane przez dokręcenie lub wymianę złączki. Należy jednak pamiętać, że zbyt mocno dokręcone metalowe złączki zaciskowe mogą przeciekać, a plastikowe złączki dociskowe mogą się zużywać. Jeśli przeciek w złączce nie ustaje po lekkim dokręceniu złączki, należy rozebrać złączkę i sprawdzić, czy nie ma uszkodzeń (np. odkształconej tulei lub cząstek na powierzchni uszczelniającej). Jeśli złączka lub tulejka są uszkodzone, wymień je na nowe.
Nieszczelne okucia
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Luźne dopasowanie | Dokręć złączkę |
| Rozebrany montaż | Wymień złączkę |
| Przekręcona złączka | Poluzuj i dokręć złączkę. Jeśli złączka jest uszkodzona, wymień ją. |
| Brudne dopasowanie | Zdemontuj złączkę i wyczyść ją. Jeśli złączka jest uszkodzona, wymień ją. |
| Niedopasowane części | Używaj wszystkich części tej samej marki/typu. |
Wycieki w pompie
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Luźne zawory zwrotne | Dokręcić zawór zwrotny (nie przekręcać) lub wymienić zawór zwrotny |
| Luźne okucia | Dokręcić złączki (nie dokręcać zbyt mocno) |
| Awaria uszczelnienia miksera | Napraw lub wymień |
| Awaria uszczelki pompy | Napraw lub wymień uszczelkę |
| Awaria tłumika pulsacji | Wymień tłumik pulsacji |
| Awaria zaworu proporcjonalnego | Sprawdź membrany, wymień jeśli są nieszczelne i/lub sprawdź pod kątem uszkodzeń łączników, wymień |
| Zawór wylotowy | Dokręć zawór lub wymień go, jeśli jest uszkodzony |
Nieszczelny wtryskiwacz
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Awaria uszczelnienia wirnika | Odbuduj lub wymień wirnik |
| Zablokowana pętla | Wyczyść lub wymień pętlę |
| Luźna uszczelka portu wtryskiwacza | Dostosować |
| Niewłaściwa średnica igły strzykawki | Użyj odpowiedniej strzykawki |
| Syfonowanie linii kanalizacyjnej | Utrzymuj linię ściekową nad obszarem powierzchniowym, z odpowiednim nachyleniem |
| Zablokowanie linii kanalizacyjnej | Wymień przewód odpływowy |
Nieszczelności kolumny
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Luźne zakończenie | Dokręcić końcówkę |
| Uszczelnienie kolumny w tulei | Zdemontować, przepłukać skuwkę, zmontować ponownie |
| Niewłaściwa grubość fryty | Użyj odpowiedniej fryty (*) |
*Uwaga: Gdy wielkość cząstek fazy stacjonarnej wynosi od 3 do 4 µm, należy użyć spieku 0,5 µm. Gdy wielkość cząstek fazy stacjonarnej wynosi od 5 do 20 µm, należy użyć fryty 2 µm.
Wykrywacz przecieków
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Awaria uszczelki ogniwa | Zapobiegaj nadmiernemu ciśnieniu wstecznemu lub wymień uszczelkę |
| Okna pękniętej komórki | Wymień okno(a) komórki |
| Nieszczelne okucia | Dokręć lub wymień złączki |
| Zablokowana linia kanalizacyjna | Wymień przewód odpływowy |
| Zablokuj komorę przepływową | Odbuduj lub wymień komorę przepływową |
Problemy z chromatogramem
Wiele problemów w systemie LC pojawia się jako zmiany na chromatogramie. Niektóre z nich można rozwiązać poprzez zmiany w aparacie, jednak inne problemy wymagają modyfikacji procedury oznaczenia. Ustawienie właściwego typu kolumny, kolumny wstępnej lub kolumny ochronnej, rurek, celi detekcyjnej i fazy ruchomej są kluczem do dobrej chromatografii .
Szczytowe ogonowanie
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zablokowana fryta | Odwróć kolumnę spłukiwania (jeśli jest dozwolona) lub wymień frytę (jeśli jest dozwolona) lub wymień kolumnę |
| Pusta kolumna | Wypełnij pustkę |
| Zakłócający szczyt | Użyj dłuższej kolumny lub zmień fazę ruchomą i/lub selektywność kolumny |
| Niewłaściwe pH fazy ruchomej | Dostosuj pH. W przypadku związków zasadowych niższe pH zwykle zapewnia bardziej symetryczne piki |
| Próbka reagująca z aktywnymi miejscami | Dodaj odczynnik pary jonowej lub lotny modyfikator zasadowy lub zmień kolumnę |
Front szczytu
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Niska temperatura | Zwiększ temperaturę kolumny |
| Niewłaściwy rozpuszczalnik próbki | Użyj fazy ruchomej do wstrzykiwania rozpuszczalnika |
| Przeciążenie próbki | Zmniejsz stężenie próbki |
| Zła kolumna | Odwróć kolumnę płukania (jeśli jest to dozwolone) lub wymień frytę wlotową (jeśli jest dozwolona) lub wymień kolumnę. |
Podzielone szczyty
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zanieczyszczenie na wlocie osłony lub kolumny analitycznej | Usuń kolumnę ochronną i spróbuj przeprowadzić analizę. w razie potrzeby wymienić kolumnę ochronną. Jeśli kolumna analityczna jest zablokowana, odwrócić i przepłukać (jeśli jest to dozwolone). Jeśli problem nie ustąpi, kolumna może być zanieczyszczona silnie zatrzymywanymi zanieczyszczeniami. Zastosuj odpowiednią procedurę przywracania (patrz informacje dotyczące pielęgnacji kolumny). Jeśli problem nie ustąpi, prawdopodobnie wlot jest zatkany. Zmień frytę lub wymień kolumnę. |
| Próbka rozpuszczalnika niezgodna z fazą ruchomą | Zmień rozpuszczalnik. jeśli to możliwe, wstrzykiwać próbki w fazie ruchomej. |
Zniekształcenie większych szczytów
Zniekształcenie szczytowe może być spowodowane przeciążeniem próbki. Zmniejsz wielkość próbki.
Zniekształcenie wczesnych szczytów
Zniekształcenie wczesnych pików elucyjnych może być spowodowane niewłaściwym rozpuszczalnikiem do wstrzykiwania. Zmniejsz objętość wtrysku lub użyj słabszego rozpuszczalnika do wtrysku.
Tailing, wczesne szczyty bardziej niż późniejsze
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Efekty pozakolumnowe | Zamontuj ponownie system (krótszy, węższy przewód), użyj celi detektora o mniejszej objętości |
Zwiększone ogonowanie wraz ze wzrostem k'
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Wtórne efekty retencji, tryb odwróconej fazy | Dodaj trietyloaminę (próbki podstawowe) lub octan (próbki kwasowe) lub sól lub bufor (próbki jonowe) lub wypróbuj inną kolumnę. |
| Wtórne efekty retencji, tryb normalnofazowy | Dodać trietyloaminę (związki zasadowe) lub kwas octowy (związki kwasowe) lub wodę (związki wielofunkcyjne). Tylko dla metod w fazie normalnej, w których stosuje się rozpuszczalniki mieszające się z wodą. Możesz także wypróbować inną metodę LC. |
| Wtórne efekty retencji, chromatografia par jonowych | Dodaj trietyloaminę (próbki podstawowe) |
Kwaśny lub zasadowy ogon pików
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Nieodpowiednie buforowanie | Użyj stężenia buforu 50 do 100 mM, użyj buforu o pKa równym pH fazy ruchomej |
Dodatkowe szczyty
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Upiorne szczyty | Zanieczyszczenia w próbce, odczynnikach lub użytym materiale. Zmień procedurę czyszczenia i/lub sprawdź możliwe źródło zanieczyszczenia (szkło, fiolki, zużyte odczynniki, rozpuszczalniki itp.) |
| Późny pik wymywania z poprzedniego wstrzyknięcia | Zwiększ czas pracy lub nachylenie gradientu i/lub zwiększ natężenie przepływu |
Dryf czasu retencji
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Słaba kontrola temperatury | Użyj termostatu kolumny. Jeśli z niego korzystasz, sprawdź jego poprawność działania. |
| Zmiana fazy ruchomej | Zapobiegaj zmianom (parowanie, reakcja itp.) |
| Słaba równowaga kolumny | Daj więcej czasu na równoważenie kolumny między seriami |
Nagłe zmiany czasu przechowywania
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zmiana natężenia przepływu | Zresetuj natężenie przepływu |
| Pęcherzyk powietrza w pompie | Odpowietrzyć pompę |
| Niewłaściwa faza ruchoma | Wymień fazę ruchomą na właściwą i/lub ustaw odpowiednią mieszankę fazy ruchomej na sterowniku |
Dryf linii bazowej
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Wahania temperatury kolumny. Nawet niewielkie zmiany powodują cykliczny wzrost i spadek wartości bazowej. Najczęściej wpływa na detektory współczynnika załamania, UV i przewodności przy wysokiej czułości | Kontroluj temperaturę kolumny i fazy ruchomej, użyj wymiennika ciepła przed detektorem |
| Niejednorodna faza ruchoma. Dryf linii bazowej jest zwykle związany z wyższą absorbancją, a nie cyklicznym wzorcem wynikającym z wahań temperatury. | Używaj rozpuszczalników klasy HPLC, soli o wysokiej czystości i dodatków. Odgazować fazę ruchomą przed użyciem, przepłukać helem podczas użytkowania. |
| Nagromadzenie zanieczyszczeń lub powietrza w komorze detektora | Przepłucz celę metanolem lub innym silnym rozpuszczalnikiem. Jeśli to konieczne, wyczyść ogniwo 1N HNO 3 (nigdy nie używaj HCl). |
| Zatkany przewód wyjściowy za detektorem. Wysokie ciśnienie powoduje pękanie wiatraków komórek, wytwarzając zaszumioną linię bazową. | Odłącz lub wymień linię. Aby wymienić szybkę, zapoznaj się z instrukcją czujki. |
| Problem z mieszaniem fazy ruchomej lub zmiana natężenia przepływu | Prawidłowy skład lub szybkość przepływu. Aby uniknąć tego problemu, rutynowo monitoruj skład i szybkość przepływu. |
| Powolne równoważenie kolumny, zwłaszcza przy zmianie fazy ruchomej | Przepłukać rozpuszczalnikiem o średniej mocy, przepuścić 10 do 20 objętości kolumny nowej fazy ruchomej przed analizą |
| Faza ruchoma zanieczyszczona, zepsuta lub przygotowana z materiałów niskiej jakości | Przygotowanie fazy ruchomej Chack. Używaj najwyższej jakości chemikaliów i rozpuszczalników HPLC |
| Silnie zatrzymywane materiały w próbce (wysokie k') mogą eluować jako bardzo szerokie piki i wydają się być rosnącą linią podstawową (analiza gradientowa może pogorszyć problem). | Użyj kolumny strażniczej. Jeśli to konieczne, przepłucz kolumnę silnym rozpuszczalnikiem między iniekcjami lub okresowo podczas analizy. |
| Faza ruchoma poddana recyklingowi, ale detektor nie jest wyregulowany | Zresetuj linię bazową. Użyj nowej fazy ruchomej, gdy przekroczony zostanie zakres dynamiczny detektora. |
| Detektor (UV) nie ustawiony na maksimum absorbancji, ale na nachyleniu krzywej | Zmień długość fali na maksymalną absorbancję UV |
Szum linii bazowej (regularny)
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Powietrze w fazie ruchomej, komórka detekcyjna lub pompa | Faza mobilna odgazowania. System płukania w celu usunięcia powietrza z celi detektora lub pompy. |
| Przeciek | Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy. |
| Niepełne mieszanie fazy ruchomej | Fazę ruchomą należy wymieszać ręcznie lub użyć mniej lepkiej próbki. |
| Efekt temperatury (kolumna w wysokiej temperaturze lub czujka nieogrzewana) | Zmniejsz różnicę lub dodaj wymiennik ciepła |
| Inny sprzęt elektroniczny na tej samej linii | odizoluj LC, detektor lub rejestrator/komputer, aby określić, czy źródło problemu jest zewnętrzne. W razie potrzeby popraw. |
| Pulsacja pompy | Włącz tłumik pulsacji do systemu. |
Szum linii bazowej (nieregularny)
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Przeciek | Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy. |
| Faza ruchoma zanieczyszczona, zepsuta lub przygotowana z materiałów niskiej jakości | Sprawdź przygotowanie fazy ruchomej |
| Rozpuszczalniki fazy ruchomej niemieszalne | Wybierz i używaj tylko mieszalnych rozpuszczalników |
| Powietrze uwięzione w systemie | Przepłucz system silnym rozpuszczalnikiem |
| Pęcherzyki powietrza w detektorze | Wyczyść detektor. Zainstaluj urządzenie przeciwciśnieniowe za detektorem |
| Elektronika detektora/rejestratora | Izoluj elektronicznie detektor i rejestrator/komputer. Zapoznaj się z instrukcją obsługi, aby rozwiązać problem. |
| Zanieczyszczona komórka detektora (nawet niewielkie ilości zanieczyszczeń mogą powodować hałas) | Wyczyść celę przepłukując 1N HNO 3 (nigdy nie używaj HCl) |
| Słaba lampa detektora | Wymień lampę |
| Kolumna wyciekająca krzemionka lub materiał wypełniający | Zastąp kolumnę |
| Niewłaściwy lub wadliwy mikser fazy ruchomej | Napraw lub wymień mikser lub miksuj poza linią, jeśli jest to izokratyczne. |
Szerokie szczyty
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zmienił się skład fazy ruchomej | Przygotuj nową fazę mobilną |
| Zbyt niski przepływ fazy ruchomej | Dostosuj natężenie przepływu |
| Wycieki (szczególnie między kolumną a detektorem) | Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy. |
| Ustawienia detektora są nieprawidłowe | Dostosuj ustawienia |
| Za niskie stężenie buforu | Zwiększ stężenie buforu |
| Kolumna ochronna zanieczyszczona/zużyta | Wymień kolumnę ochronną |
| Kolumna zanieczyszczona/zużyta. Niski numer rejestracyjny. | Zastąp kolumnę nową tego samego typu. |
| Pustka na wlocie kolumny | Otwórz koniec wlotu i wypełnij pustkę lub wymień kolumnę |
| Pik reprezentuje dwa lub więcej słabo rozdzielonych związków | Zmień typ kolumny, aby poprawić separację |
| Zbyt niska temperatura kolumny | Zwiększ temperaturę. Nie przekraczać 60°C, chyba że producent kolumny akceptuje wyższe temperatury. |
| Zbyt duża stała czasowa detektora | Użyj mniejszej stałej czasowej |
Szerokie piki mogą być spowodowane efektami pozakolumnowymi:
- Przeciążona kolumna - wstrzyknąć mniejszą objętość (np. 10 µl zamiast 100 µl) lub rozcieńczyć próbkę
- Zbyt duży czas odpowiedzi detektora lub objętość komórki — skróć czas odpowiedzi lub użyj mniejszej komórki
- Zbyt długa rurka między kolumną a detektorem, zbyt duża średnica wewnętrzna — w miarę możliwości należy użyć jak najkrótszego kawałka rurki o średnicy wewnętrznej 0,007" do 0,010" (techniki UHPLC wymagają użycia rurki o średnicy wewnętrznej 0,005")
- Zbyt długi czas reakcji rejestratora — skróć czas odpowiedzi
Utrata rozdzielczości
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zanieczyszczona faza ruchoma (pogorszona (powodująca zmianę czasu retencji) | Przygotuj nową fazę mobilną |
| Zablokowana osłona lub kolumna analityczna | Usuń kolumnę ochronną i analizę próby. W razie potrzeby wymień osłonę. Jeśli kolumna analityczna jest zablokowana, odwrócić i przepłukać. Jeśli problem nie ustąpi, kolumna może być zanieczyszczona silnie zatrzymywanymi zanieczyszczeniami. Stosować odpowiednią procedurę renowacji zgodnie z instrukcją producenta. Jeśli problem nie ustąpi, prawdopodobnie wlot jest zatkany. Zmień frytę lub wymień kolumnę. |
Wszystkie szczyty za małe
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zbyt wysokie tłumienie czujki | Zmniejsz tłumienie |
| Zbyt duża stała czasowa detektora | Użyj mniejszej stałej czasowej |
| Zbyt mały rozmiar wtrysku | Zwiększ stężenie próbki lub zwiększ objętość wtrysku, jeśli pozwala na to rozmiar kolumny |
| Nieprawidłowe podłączenie rejestratora | Użyj prawidłowego połączenia |
Wszystkie szczyty są za duże
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zbyt niskie tłumienie czujki | Użyj większego tłumienia |
| Zbyt duży rozmiar wtrysku | Zmniejsz stężenie próbki lub zmniejsz objętość wtrysku, użyj mniejszej pętli próbki lub użyj częściowego wypełnienia pętli |
| Nieprawidłowe podłączenie rejestratora | Użyj prawidłowego połączenia |
Problemy z wtryskiwaczem
Ręczny wtryskiwacz, trudny do skręcania
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Uszkodzona uszczelka wirnika | Odbudować lub wymienić uszczelkę/zawór |
| Zbyt ciasny wirnik | Dostosuj napięcie wirnika |
Ręczny wtryskiwacz, trudny do załadowania
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zawór źle wyrównany | Dostosuj wyrównanie |
| Zablokowana pętla | Wymień pętlę |
| Brudna strzykawka | Wyczyść lub wymień strzykawkę |
| Zablokowane linie | Wyczyść lub zastąp wiersze |
Wtryskiwacz autosamplera - nie obraca się
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Brak ciśnienia powietrza lub mocy | Zapewnij odpowiednie ciśnienie/moc |
| Zbyt ciasny wirnik | Dostosować |
| Zawór źle wyrównany | Dostosuj wyrównanie |
Autosampler - inne problemy
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Zablokowanie | Wyczyść lub wymień zablokowaną część |
| Zakleszczony mechanizm | Zobacz instrukcję serwisową |
| Wadliwy kontroler | Napraw lub wymień kontroler |
Problemy wykryte przez zapach, wzrok lub dźwięk
Zapach rozpuszczalnika
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Przeciek | Zobacz sekcję Przecieki |
| Rozlanie | Sprawdź, czy pojemnik na odpady nie jest przepełniony lub zlokalizuj wyciek i posprzątaj |
"Gorący" zapach
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Moduł przegrzewania | Sprawdź, czy wentylacja jest prawidłowa, wyreguluj ją lub sprawdź ustawienie temperatury, wyreguluj lub wyłącz moduł, patrz instrukcja serwisowa |
Nieprawidłowe odczyty liczników
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Nieprawidłowe ciśnienie | Patrz rozdział Nieprawidłowe ciśnienie |
| Problem z piecem kolumnowym | Sprawdź ustawienia i wyreguluj, patrz instrukcja serwisowa |
| Awaria lampy detektora | Wymień lampę |
Światła ostrzegawcze
| Możliwa przyczyna | rozwiązanie |
|---|---|
| Przekroczono limit ciśnienia | Sprawdź, czy nie ma blokady lub sprawdź ustawienia limitów i dostosuj je |
| Inne lampy ostrzegawcze | Patrz instrukcja obsługi/serwisu |
Brzęczyki ostrzegawcze
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Wyciek/rozlanie rozpuszczalnika | Zlokalizuj i popraw |
| Inne brzęczyki ostrzegawcze | Patrz instrukcja obsługi/serwisu |
Piski i piski
| Możliwa przyczyna | Rozwiązanie |
|---|---|
| Awaria łożyska | Zobacz instrukcję serwisową |
| Słabe smarowanie | W razie potrzeby nasmaruj |
| Zużycie mechaniczne | Zobacz instrukcję serwisową |
Właściwości rozpuszczalników
| Rozpuszczalnik | Indeks polaryzacji | Współczynnik załamania światła (20°C) | Odcięcie UV (nm) (1 PLN) | Temperatura wrzenia (°C) | Lepkość (mPa.s; 20 °C) | Mieszalność z wodą |
| Kwas octowy | 6,2 | 1,372 | 230 | 118 | 1,26 | 100 |
| Aceton | 5.1 | 1359 | 330 | 56 | 0,32 | 100 |
| Acetonitryl | 5,8 | 1,344 | 190 | 82 | 0,37 | 100 |
| Benzen | 2,7 | 1501 | 280 | 80 | 0,65 | 0,18 |
| Octan butylu | 4.0 | 1,094 | 254 | 125 | 0,73 | 0,43 |
| n-butanol | 3,9 | 1,399 | 215 | 118 | 2,98 | 7,81 |
| Tetrachlorek węgla | 1,6 | 1466 | 263 | 77 | 0,97 | 0,08 |
| Chloroform | 4.1 | 1466 | 245 | 61 | 0,57 | 0,815 |
| Cykloheksan | 0,2 | 1426 | 200 | 81 | 1,00 | 0,01 |
| Chlorek etylenu | 3,5 | 1,444 | 225 | 84 | 0,79 | 0,81 |
| Chlorek metylenu | 3.1 | 1424 | 235 | 41 | 0,44 | 1,6 |
| Dimetyloformamid | 6,4 | 1,431 | 268 | 155 | 0,92 | 100 |
| Dimetylosulfotlenek | 7,2 | 1478 | 268 | 189 | 2.00 | 100 |
| Dioksan | 4,8 | 1422 | 215 | 101 | 1,54 | 100 |
| Octan etylu | 4.4 | 1,372 | 260 | 77 | 0,45 | 8,7 |
| Etanol | 5.2 | 1360 | 210 | 78 | 1,20 | 100 |
| Eter dietylowy | 2,8 | 1,353 | 220 | 35 | 0,32 | 6,89 |
| Heptan | 0.0 | 1,387 | 200 | 98 | 0,39 | 0,0003 |
| Heksan | 0.0 | 1,375 | 200 | 69 | 0,33 | 0,001 |
| Metanol | 5.1 | 1,329 | 205 | 65 | 0,60 | 100 |
| Eter metylobutylowy | 2,5 | 1,369 | 210 | 55 | 0,27 | 4,8 |
| Keton metylowo-etylowy | 4,7 | 1,379 | 329 | 80 | 0,45 | 24 |
| Pentan | 0.0 | 1,358 | 200 | 36 | 0,23 | 0,004 |
| n-Propanol | 4.0 | 1,384 | 210 | 97 | 2,27 | 100 |
| izoPropanol | 3,9 | 1,377 | 210 | 82 | 2.30 | 100 |
| Eter diizopropylowy | 2.2 | 1,368 | 220 | 68 | 0,37 | |
| Tetrahydrofuran | 4.0 | 1407 | 215 | 65 | 0,55 | 100 |
| Toluen | 2,4 | 1496 | 285 | 111 | 0,59 | 0,051 |
| Trichloroetylen | 1,0 | 1477 | 273 | 87 | 0,57 | 0,11 |
| Woda | 9,0 | 1,333 | 200 | 100 | 1,00 | 100 |
| Ksylen | 2,5 | 1500 | 290 | 139 | 0,61 | 0,018 |
Zależność lepkości mieszaniny rozpuszczalników od jej składu procentowego
| % Z wody | Lepkość (MeOH/woda) | Lepkość (ACN/woda) |
| 0 | 0,65 | 0,35 |
| 10 | 0,95 | 0,50 |
| 20 | 1,20 | 0,55 |
| 30 | 1,60 | 0,70 |
| 40 | 1,75 | 0,80 |
| 50 | 1,90 | 0,90 |
| 60 | 1.80 | 1,00 |
| 70 | 1,75 | 1,05 |
| 80 | 1,65 | 1.10 |
| 90 | 1,40 | 1,05 |
| 100 | 1,00 | 1,00 |
Szacowanie ciśnienia na kolumnach HPLC w zależności od wielkości cząstek, średnicy i długości kolumny
| Wielkość cząstek (µm) | ID (mm) | Przepływ (ml/min) | Nacisk 150mm* (PSI) | Nacisk 250mm* (PSI) |
| 3 | 4,6 | 0,5 – 1,0 | 1000 | 1500 |
| 5 | 3,0 | 0,4 – 0,8 | 750 | 1250 |
| 5 | 4,6 | 1,0 - 2,0 | 700 | 1100 |
| 5 | 10,0 | 5,0 - 10,0 | 750 | 1250 |
| 10 | 4,6 | 2,0 - 5,0 | 400 | 600 |
| 10 | 10,0 | 10,0 - 20,0 | 500 | 800 |
| 10 | 21,2 | 20,0 - 40,0 | 300 | 500 |
* Gdy natężenie przepływu mieści się w dolnych granicach zalecanych natężenia przepływu