0 Porównywać
Dodaj produkty do porównania za pomocą ikony wagi, a następnie porównaj ich parametry.
Użytkownik
0 Kosz
Twój koszyk jest pusty...

Chromatografia

Agilent GC AS syringes with fixed needles

Objętość [ µl] Długość igły [ mm ] Średnica igły Zakończenie igły Gazoszczelny
5 42 26 Stożek ×
5 42 23 Stożek ×
5 42 23-26 Stożek ×
10 42 26 Stożek ×
10 42 23 Stożek ×
10 42 23 Stożek tak
10 42 23-26 Stożek ×
10 42 23-26 Stożek tak
25 42 23-26 Stożek tak
50 42 23-26 Stożek tak
100 42 23-26 Stożek tak

Przegląd oficjalnych metod wykorzystujących kolumny immunopowinowactwa

Lista oficjalnych metod wykorzystujących pola VICAM o powinowactwie immunologicznym

CEN (Europejski Komitet Normalizacyjny)
Oficjalna metoda Mikotoksyna Data wydania Metoda
EN - 12955 Aflatoksyna Lipiec 1999 Środki spożywcze - Oznaczanie aflatoksyny B1 i suma aflatoksyn B1, B2, G1 i G2 w zbożach, muszlach i produktach pochodnych - Wysokosprawna metoda chromatografii cieczowej z derywatyzacją po kolumnie i oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego
EN - 14123 Aflatoksyna Styczeń 2008 Środki spożywcze - Oznaczanie aflatoksyny B1 i sumy aflatoksyn B1, B2, G1 i G2 w orzechach laskowych, orzeszkach ziemnych, przetokach, figach i paprykach w proszku - Metoda wysokosprawnej chromatografii cieczowej z derywatyzacją po kolumnie i oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego
EN - 14132 Ochratoksyna A 2009 Środki spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w jęczmieniu i prażonej kawie - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego
EN - 14133 Ochratoksyna A Lipiec 2003 Środki spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w winie i piwie - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego
EN - 14352 Fumonisin Lipiec 2004 Foods - Oznaczanie fumonizyny B1 i B2 w żywności na bazie kukurydzy - Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny powinowactwa immunologicznego
EN ISO 14501 Aflatoksyna 2007 Mleko i mleko w proszku - Oznaczanie zawartości aflatoksyny M1 - Oznaczanie metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej
EN - 15829 Ochratoksyna A 2010 Artykuły spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w porzeczkach, rodzynkach, sułtankach, suszonych owocach i suszonych figach. Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny immunologicznej i wykrywaniem fluorescencji
EN - 15835 Ochratoksyna A 2010 Artykuły spożywcze - Oznaczanie ochratoksyny A w żywności na bazie zbóż dla niemowląt i małych dzieci. Metoda HPLC z oczyszczaniem kolumny immunologicznej i wykrywaniem fluorescencji

Rx-35sil MS

Rxi® - kapilarne kolumny GC Kolumna GC

Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.

Zalety kolumn Rxi®
  • Ultra-niskie krwawienie
  • Wyjątkowa bezwładność
  • Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami
Aplikacje
  • Pestycydy chloroorganiczne
  • Kongenery PCB i mieszaniny Aroclor
  • Herbicydy
  • Preparaty farmaceutyczne
  • Sterole
  • Estry ftalanów
Ograniczenia temperatury
ID (mm) df (μm) Granice wartości progowych (° C)
0,25 0,25 50 do 340/360
0,32 0,25 50 do 340/360
0,53 0,50 50 do 320/340

Rxi-624Sil MS

Rxi® - kapilarne kolumny GC Kolumna GC

Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.

Zalety kolumn Rxi®
  • Ultra-niskie krwawienie
  • Wyjątkowa bezwładność
  • Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami

Faza stacjonarna Rxi®-624Sil MS

  • Wyróżniają się kształtem szczytów wielu związków, zarówno kwasowych, jak i zasadowych
  • Wysoka selektywność w przypadku unieszkodliwiania resztkowego rozpuszczalnika, USP 467 Medium Bronze Wheel
Aplikacje
  • Resztkowe rozpuszczalniki
Ograniczenia temperatury
ID (mm) df (μm) Granice wartości progowych (° C)
0,18 1,00 -60 do 300/320
0,25 1,40 -60 do 300/320
0,32 1,80 -60 do 300/320
0,53 3,00 -60 do 280/300

Rx-5 HT

Kolumna GC Rxi® - kapilarne kolumny GC

Te kolumny zostały specjalnie zaprojektowane, aby być najlepszym dostępnym produktem pod względem wyjątkowej bezwładności, bardzo niskiego krwawienia, powtarzalności czasów retencji i selektywności. Oprócz tych cech kolumny Rxi® GC mają długą żywotność. Restek opracował stabilną, powtarzalną produkcję, aby zaspokoić potrzeby analityków dla kolumny Rxi®.

Zalety kolumn Rxi®
  • Ultra-niskie krwawienie
  • Wyjątkowa bezwładność
  • Odtwarzalność między poszczególnymi kolumnami
Aplikacje
  • Analiza olejów silnikowych i wrzących paliw
  • Polimery
  • Woski
  • Metody podobnej destylacji
  • Długołańcuchowe węglowodory
  • Trójglicerydy
Ograniczenia temperatury
ID (mm) df (μm) Ograniczenia temperatury * (° C)
0,25 0.10 -60 do 400
0,25 0,25 -60 do 400
0,32 0.10 -60 do 400
0,32 0,25 -60 do 400
0,53 0,15 -60 do 400

* Max. temperatura wynosi do 430 ° C, ale żywotność kolumn zostanie zmniejszona.

Konwersja wielkości cząstek

Rozmiar w MESH Rozmiar w μm Rozmiar w calach
40 420 0,0165
45 354 0,0139
50 297 0,0117
60 250 0,0098
70 210 0,0083
80 177 0,0070
100 149 0,0059
120 125 0,0049
140 105 0,0041
170 88 0,0035
200 74 0,0029
230 63 0,0025
270 53 0,0021
325 44 0,0017
400 37 0,0015

HPLC troubleshooting

Nieprawidłowe ciśnienie

Brak odczytu ciśnienia, brak przepływu
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Wyłącz zasilanie Włącz zasilanie
Przepalony bezpiecznik Wymień bezpiecznik
Ustawienie lub awaria sterownika Sprawdź prawidłowe ustawienia, napraw lub wymień sterownik
Zepsuty tłok Wymień tłok
Powietrze uwięzione w głowicy pompy Faza ruchoma odgazowania, odpowietrzenie pompy i pompy zalewania
Niewystarczająca faza ruchoma Uzupełnij zbiornik, wymień frytę wlotową, jeśli jest zablokowana
Wadliwe zawory zwrotne Wymień zawory zwrotne
Poważny wyciek Dokręć lub wymień złączki
Wsparcie Teraz odczyt ciśnienia, przepływ jest normalny
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Wadliwy licznik Wymień miernik
Wadliwy przetwornik ciśnienia Wymień przetwornik

Wysokie ciśnienie wsteczne
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zbyt wysokie natężenie przepływu Dostosuj ustawienia
Zablokowana fryta kolumnowa Kolumnę z płukaniem wstecznym, jeśli jest to dozwolone, wymień frytę zgodnie z instrukcjami producenta i warunkami gwarancji lub wymień kolumnę
Niewłaściwa faza ruchoma, wytrącony bufor Stosować prawidłową fazę ruchomą, przemyć kolumnę
Niewłaściwa kolumna Użyj odpowiedniej kolumny
Blokada wtryskiwacza Usuń blokadę lub wymień wtryskiwacz
Zbyt niska temperatura kolumny Podnieś temperaturę
Awaria kontrolera Napraw lub wymień kontroler
Zablokowana kolumna ochronna Usuń/wymień kolumnę ochronną
Zablokowany filtr liniowy Usuń/wymień filtr wbudowany

Powinieneś dowiedzieć się, co spowodowało wysokie ciśnienie wsteczne - kolumna czy system? Zalecamy następującą procedurę:

Wyjmij kolumnę z systemu i włącz pompę. Jeśli wysokie ciśnienie wsteczne nadal występuje, oznacza to, że w systemie jest blokada:

  • zablokowane lub zaciśnięte przewody
  • brudna fryta pompy
  • lub zatkany zawór wtryskowy

Jeśli ciśnienie jest normalne, występuje problem z kolumną:

  • zatkany lub uszkodzony filtr kolumny wstępnej, kolumny ochronnej lub fryty
  • wytrącanie próbki lub buforu w kolumnie
Niskie ciśnienie wsteczne

nacisk

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zbyt niski przepływ Dostosuj natężenie przepływu
Wyciek w systemie Zlokalizuj i popraw
Niewłaściwa kolumna Użyj odpowiedniej kolumny
Za wysoka temperatura kolumny Niższa temperatura
Awaria kontrolera Napraw lub wymień kontroler
Zmienne ciśnienie

Patrz rozdział Wysokie przeciwciśnienie .

Ciśnienie spada do zera

Patrz sekcje Brak odczytu ciśnienia, brak przepływu i Brak odczytu ciśnienia, przepływ jest normalny

Spadek ciśnienia, ale nie do zera

Patrz rozdział Niskie ciśnienie

Cykliczne ciśnienie
Możliwy przypadek Rozwiązanie
Powietrze w pompie Odgazuj rozpuszczalnik i/lub spuść powietrze z pompy
Wadliwy zawór(-y) zwrotny(-e) Wymień zawory zwrotne
Awaria uszczelki pompy Wymień uszczelkę pompy
Niewystarczające odgazowanie Odgazuj rozpuszczalnik i/lub zmień metody odgazowania (np. użyj odgazowywacza próżniowego)
Wyciek w systemie Zlokalizuj wyciek i napraw go
Korzystanie z elucji gradientowej Cykliczne zmiany ciśnienia są normalne ze względu na zmianę lepkości

Wycieki

Wycieki są zwykle zatrzymywane przez dokręcenie lub wymianę złączki. Należy jednak pamiętać, że zbyt mocno dokręcone metalowe złączki zaciskowe mogą przeciekać, a plastikowe złączki dociskowe mogą się zużywać. Jeśli przeciek w złączce nie ustaje po lekkim dokręceniu złączki, należy rozebrać złączkę i sprawdzić, czy nie ma uszkodzeń (np. odkształconej tulei lub cząstek na powierzchni uszczelniającej). Jeśli złączka lub tulejka są uszkodzone, wymień je na nowe.

Nieszczelne okucia

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Luźne dopasowanie Dokręć złączkę
Rozebrany montaż Wymień złączkę
Przekręcona złączka Poluzuj i dokręć złączkę. Jeśli złączka jest uszkodzona, wymień ją.
Brudne dopasowanie Zdemontuj złączkę i wyczyść ją. Jeśli złączka jest uszkodzona, wymień ją.
Niedopasowane części Używaj wszystkich części tej samej marki/typu.
Wycieki w pompie
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Luźne zawory zwrotne Dokręcić zawór zwrotny (nie przekręcać) lub wymienić zawór zwrotny
Luźne okucia Dokręcić złączki (nie dokręcać zbyt mocno)
Awaria uszczelnienia miksera Napraw lub wymień
Awaria uszczelki pompy Napraw lub wymień uszczelkę
Awaria tłumika pulsacji Wymień tłumik pulsacji
Awaria zaworu proporcjonalnego Sprawdź membrany, wymień jeśli są nieszczelne i/lub sprawdź pod kątem uszkodzeń łączników, wymień
Zawór wylotowy Dokręć zawór lub wymień go, jeśli jest uszkodzony
Nieszczelny wtryskiwacz
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Awaria uszczelnienia wirnika Odbuduj lub wymień wirnik
Zablokowana pętla Wyczyść lub wymień pętlę
Luźna uszczelka portu wtryskiwacza Dostosować
Niewłaściwa średnica igły strzykawki Użyj odpowiedniej strzykawki
Syfonowanie linii kanalizacyjnej Utrzymuj linię ściekową nad obszarem powierzchniowym, z odpowiednim nachyleniem
Zablokowanie linii kanalizacyjnej Wymień przewód odpływowy
Nieszczelności kolumny

otaznik

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Luźne zakończenie Dokręcić końcówkę
Uszczelnienie kolumny w tulei Zdemontować, przepłukać skuwkę, zmontować ponownie
Niewłaściwa grubość fryty Użyj odpowiedniej fryty (*)

*Uwaga: Gdy wielkość cząstek fazy stacjonarnej wynosi od 3 do 4 µm, należy użyć spieku 0,5 µm. Gdy wielkość cząstek fazy stacjonarnej wynosi od 5 do 20 µm, należy użyć fryty 2 µm.

Dead volume

Wykrywacz przecieków
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Awaria uszczelki ogniwa Zapobiegaj nadmiernemu ciśnieniu wstecznemu lub wymień uszczelkę
Okna pękniętej komórki Wymień okno(a) komórki
Nieszczelne okucia Dokręć lub wymień złączki
Zablokowana linia kanalizacyjna Wymień przewód odpływowy
Zablokuj komorę przepływową Odbuduj lub wymień komorę przepływową

Problemy z chromatogramem

Wiele problemów w systemie LC pojawia się jako zmiany na chromatogramie. Niektóre z nich można rozwiązać poprzez zmiany w aparacie, jednak inne problemy wymagają modyfikacji procedury oznaczenia. Ustawienie właściwego typu kolumny, kolumny wstępnej lub kolumny ochronnej, rurek, celi detekcyjnej i fazy ruchomej są kluczem do dobrej chromatografii .

Szczytowe ogonowanie

Szczytowe ogonowanie

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zablokowana fryta Odwróć kolumnę spłukiwania (jeśli jest dozwolona) lub wymień frytę (jeśli jest dozwolona) lub wymień kolumnę
Pusta kolumna Wypełnij pustkę
Zakłócający szczyt Użyj dłuższej kolumny lub zmień fazę ruchomą i/lub selektywność kolumny
Niewłaściwe pH fazy ruchomej Dostosuj pH. W przypadku związków zasadowych niższe pH zwykle zapewnia bardziej symetryczne piki
Próbka reagująca z aktywnymi miejscami Dodaj odczynnik pary jonowej lub lotny modyfikator zasadowy lub zmień kolumnę
Front szczytu

Front szczytu

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Niska temperatura Zwiększ temperaturę kolumny
Niewłaściwy rozpuszczalnik próbki Użyj fazy ruchomej do wstrzykiwania rozpuszczalnika
Przeciążenie próbki Zmniejsz stężenie próbki
Zła kolumna Odwróć kolumnę płukania (jeśli jest to dozwolone) lub wymień frytę wlotową (jeśli jest dozwolona) lub wymień kolumnę.
Podzielone szczyty

Podzielone szczyty

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zanieczyszczenie na wlocie osłony lub kolumny analitycznej Usuń kolumnę ochronną i spróbuj przeprowadzić analizę. w razie potrzeby wymienić kolumnę ochronną. Jeśli kolumna analityczna jest zablokowana, odwrócić i przepłukać (jeśli jest to dozwolone). Jeśli problem nie ustąpi, kolumna może być zanieczyszczona silnie zatrzymywanymi zanieczyszczeniami. Zastosuj odpowiednią procedurę przywracania (patrz informacje dotyczące pielęgnacji kolumny). Jeśli problem nie ustąpi, prawdopodobnie wlot jest zatkany. Zmień frytę lub wymień kolumnę.
Próbka rozpuszczalnika niezgodna z fazą ruchomą Zmień rozpuszczalnik. jeśli to możliwe, wstrzykiwać próbki w fazie ruchomej.
Zniekształcenie większych szczytów

Zniekształcenie szczytowe może być spowodowane przeciążeniem próbki. Zmniejsz wielkość próbki.

Zniekształcenie wczesnych szczytów

Zniekształcenie wczesnych pików elucyjnych może być spowodowane niewłaściwym rozpuszczalnikiem do wstrzykiwania. Zmniejsz objętość wtrysku lub użyj słabszego rozpuszczalnika do wtrysku.

Tailing, wczesne szczyty bardziej niż późniejsze
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Efekty pozakolumnowe Zamontuj ponownie system (krótszy, węższy przewód), użyj celi detektora o mniejszej objętości
Zwiększone ogonowanie wraz ze wzrostem k'
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Wtórne efekty retencji, tryb odwróconej fazy Dodaj trietyloaminę (próbki podstawowe) lub octan (próbki kwasowe) lub sól lub bufor (próbki jonowe) lub wypróbuj inną kolumnę.
Wtórne efekty retencji, tryb normalnofazowy Dodać trietyloaminę (związki zasadowe) lub kwas octowy (związki kwasowe) lub wodę (związki wielofunkcyjne). Tylko dla metod w fazie normalnej, w których stosuje się rozpuszczalniki mieszające się z wodą. Możesz także wypróbować inną metodę LC.
Wtórne efekty retencji, chromatografia par jonowych Dodaj trietyloaminę (próbki podstawowe)
Kwaśny lub zasadowy ogon pików
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Nieodpowiednie buforowanie Użyj stężenia buforu 50 do 100 mM, użyj buforu o pKa równym pH fazy ruchomej
Dodatkowe szczyty
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Upiorne szczyty Zanieczyszczenia w próbce, odczynnikach lub użytym materiale. Zmień procedurę czyszczenia i/lub sprawdź możliwe źródło zanieczyszczenia (szkło, fiolki, zużyte odczynniki, rozpuszczalniki itp.)
Późny pik wymywania z poprzedniego wstrzyknięcia Zwiększ czas pracy lub nachylenie gradientu i/lub zwiększ natężenie przepływu
Dryf czasu retencji

hodiny

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Słaba kontrola temperatury Użyj termostatu kolumny. Jeśli z niego korzystasz, sprawdź jego poprawność działania.
Zmiana fazy ruchomej Zapobiegaj zmianom (parowanie, reakcja itp.)
Słaba równowaga kolumny Daj więcej czasu na równoważenie kolumny między seriami
Nagłe zmiany czasu przechowywania
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zmiana natężenia przepływu Zresetuj natężenie przepływu
Pęcherzyk powietrza w pompie Odpowietrzyć pompę
Niewłaściwa faza ruchoma Wymień fazę ruchomą na właściwą i/lub ustaw odpowiednią mieszankę fazy ruchomej na sterowniku
Dryf linii bazowej
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Wahania temperatury kolumny. Nawet niewielkie zmiany powodują cykliczny wzrost i spadek wartości bazowej. Najczęściej wpływa na detektory współczynnika załamania, UV i przewodności przy wysokiej czułości Kontroluj temperaturę kolumny i fazy ruchomej, użyj wymiennika ciepła przed detektorem
Niejednorodna faza ruchoma. Dryf linii bazowej jest zwykle związany z wyższą absorbancją, a nie cyklicznym wzorcem wynikającym z wahań temperatury. Używaj rozpuszczalników klasy HPLC, soli o wysokiej czystości i dodatków. Odgazować fazę ruchomą przed użyciem, przepłukać helem podczas użytkowania.
Nagromadzenie zanieczyszczeń lub powietrza w komorze detektora Przepłucz celę metanolem lub innym silnym rozpuszczalnikiem. Jeśli to konieczne, wyczyść ogniwo 1N HNO 3 (nigdy nie używaj HCl).
Zatkany przewód wyjściowy za detektorem. Wysokie ciśnienie powoduje pękanie wiatraków komórek, wytwarzając zaszumioną linię bazową. Odłącz lub wymień linię. Aby wymienić szybkę, zapoznaj się z instrukcją czujki.
Problem z mieszaniem fazy ruchomej lub zmiana natężenia przepływu Prawidłowy skład lub szybkość przepływu. Aby uniknąć tego problemu, rutynowo monitoruj skład i szybkość przepływu.
Powolne równoważenie kolumny, zwłaszcza przy zmianie fazy ruchomej Przepłukać rozpuszczalnikiem o średniej mocy, przepuścić 10 do 20 objętości kolumny nowej fazy ruchomej przed analizą
Faza ruchoma zanieczyszczona, zepsuta lub przygotowana z materiałów niskiej jakości Przygotowanie fazy ruchomej Chack. Używaj najwyższej jakości chemikaliów i rozpuszczalników HPLC
Silnie zatrzymywane materiały w próbce (wysokie k') mogą eluować jako bardzo szerokie piki i wydają się być rosnącą linią podstawową (analiza gradientowa może pogorszyć problem). Użyj kolumny strażniczej. Jeśli to konieczne, przepłucz kolumnę silnym rozpuszczalnikiem między iniekcjami lub okresowo podczas analizy.
Faza ruchoma poddana recyklingowi, ale detektor nie jest wyregulowany Zresetuj linię bazową. Użyj nowej fazy ruchomej, gdy przekroczony zostanie zakres dynamiczny detektora.
Detektor (UV) nie ustawiony na maksimum absorbancji, ale na nachyleniu krzywej Zmień długość fali na maksymalną absorbancję UV
Szum linii bazowej (regularny)
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Powietrze w fazie ruchomej, komórka detekcyjna lub pompa Faza mobilna odgazowania. System płukania w celu usunięcia powietrza z celi detektora lub pompy.
Przeciek Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy.
Niepełne mieszanie fazy ruchomej Fazę ruchomą należy wymieszać ręcznie lub użyć mniej lepkiej próbki.
Efekt temperatury (kolumna w wysokiej temperaturze lub czujka nieogrzewana) Zmniejsz różnicę lub dodaj wymiennik ciepła
Inny sprzęt elektroniczny na tej samej linii odizoluj LC, detektor lub rejestrator/komputer, aby określić, czy źródło problemu jest zewnętrzne. W razie potrzeby popraw.
Pulsacja pompy Włącz tłumik pulsacji do systemu.
Szum linii bazowej (nieregularny)
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Przeciek Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy.
Faza ruchoma zanieczyszczona, zepsuta lub przygotowana z materiałów niskiej jakości Sprawdź przygotowanie fazy ruchomej
Rozpuszczalniki fazy ruchomej niemieszalne Wybierz i używaj tylko mieszalnych rozpuszczalników
Powietrze uwięzione w systemie Przepłucz system silnym rozpuszczalnikiem
Pęcherzyki powietrza w detektorze Wyczyść detektor. Zainstaluj urządzenie przeciwciśnieniowe za detektorem
Elektronika detektora/rejestratora Izoluj elektronicznie detektor i rejestrator/komputer. Zapoznaj się z instrukcją obsługi, aby rozwiązać problem.
Zanieczyszczona komórka detektora (nawet niewielkie ilości zanieczyszczeń mogą powodować hałas) Wyczyść celę przepłukując 1N HNO 3 (nigdy nie używaj HCl)
Słaba lampa detektora Wymień lampę
Kolumna wyciekająca krzemionka lub materiał wypełniający Zastąp kolumnę
Niewłaściwy lub wadliwy mikser fazy ruchomej Napraw lub wymień mikser lub miksuj poza linią, jeśli jest to izokratyczne.
Szerokie szczyty
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zmienił się skład fazy ruchomej Przygotuj nową fazę mobilną
Zbyt niski przepływ fazy ruchomej Dostosuj natężenie przepływu
Wycieki (szczególnie między kolumną a detektorem) Zobacz sekcję Przecieki . Sprawdź system pod kątem luźnych połączeń. Sprawdź pompę pod kątem wycieków, nagromadzenia soli, nietypowego hałasu. W razie potrzeby wymień uszczelki pompy.
Ustawienia detektora są nieprawidłowe Dostosuj ustawienia
Za niskie stężenie buforu Zwiększ stężenie buforu
Kolumna ochronna zanieczyszczona/zużyta Wymień kolumnę ochronną
Kolumna zanieczyszczona/zużyta. Niski numer rejestracyjny. Zastąp kolumnę nową tego samego typu.
Pustka na wlocie kolumny Otwórz koniec wlotu i wypełnij pustkę lub wymień kolumnę
Pik reprezentuje dwa lub więcej słabo rozdzielonych związków Zmień typ kolumny, aby poprawić separację
Zbyt niska temperatura kolumny Zwiększ temperaturę. Nie przekraczać 60°C, chyba że producent kolumny akceptuje wyższe temperatury.
Zbyt duża stała czasowa detektora Użyj mniejszej stałej czasowej

chrom Szerokie piki mogą być spowodowane efektami pozakolumnowymi:

  • Przeciążona kolumna - wstrzyknąć mniejszą objętość (np. 10 µl zamiast 100 µl) lub rozcieńczyć próbkę
  • Zbyt duży czas odpowiedzi detektora lub objętość komórki — skróć czas odpowiedzi lub użyj mniejszej komórki
  • Zbyt długa rurka między kolumną a detektorem, zbyt duża średnica wewnętrzna — w miarę możliwości należy użyć jak najkrótszego kawałka rurki o średnicy wewnętrznej 0,007" do 0,010" (techniki UHPLC wymagają użycia rurki o średnicy wewnętrznej 0,005")
  • Zbyt długi czas reakcji rejestratora — skróć czas odpowiedzi
Utrata rozdzielczości
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zanieczyszczona faza ruchoma (pogorszona (powodująca zmianę czasu retencji) Przygotuj nową fazę mobilną
Zablokowana osłona lub kolumna analityczna Usuń kolumnę ochronną i analizę próby. W razie potrzeby wymień osłonę. Jeśli kolumna analityczna jest zablokowana, odwrócić i przepłukać. Jeśli problem nie ustąpi, kolumna może być zanieczyszczona silnie zatrzymywanymi zanieczyszczeniami. Stosować odpowiednią procedurę renowacji zgodnie z instrukcją producenta. Jeśli problem nie ustąpi, prawdopodobnie wlot jest zatkany. Zmień frytę lub wymień kolumnę.
Wszystkie szczyty za małe
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zbyt wysokie tłumienie czujki Zmniejsz tłumienie
Zbyt duża stała czasowa detektora Użyj mniejszej stałej czasowej
Zbyt mały rozmiar wtrysku Zwiększ stężenie próbki lub zwiększ objętość wtrysku, jeśli pozwala na to rozmiar kolumny
Nieprawidłowe podłączenie rejestratora Użyj prawidłowego połączenia
Wszystkie szczyty są za duże
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zbyt niskie tłumienie czujki Użyj większego tłumienia
Zbyt duży rozmiar wtrysku Zmniejsz stężenie próbki lub zmniejsz objętość wtrysku, użyj mniejszej pętli próbki lub użyj częściowego wypełnienia pętli
Nieprawidłowe podłączenie rejestratora Użyj prawidłowego połączenia

Problemy z wtryskiwaczem

Ręczny wtryskiwacz, trudny do skręcania
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Uszkodzona uszczelka wirnika Odbudować lub wymienić uszczelkę/zawór
Zbyt ciasny wirnik Dostosuj napięcie wirnika
Ręczny wtryskiwacz, trudny do załadowania

nařadí

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zawór źle wyrównany Dostosuj wyrównanie
Zablokowana pętla Wymień pętlę
Brudna strzykawka Wyczyść lub wymień strzykawkę
Zablokowane linie Wyczyść lub zastąp wiersze
Wtryskiwacz autosamplera - nie obraca się
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Brak ciśnienia powietrza lub mocy Zapewnij odpowiednie ciśnienie/moc
Zbyt ciasny wirnik Dostosować
Zawór źle wyrównany Dostosuj wyrównanie
Autosampler - inne problemy
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Zablokowanie Wyczyść lub wymień zablokowaną część
Zakleszczony mechanizm Zobacz instrukcję serwisową
Wadliwy kontroler Napraw lub wymień kontroler

Problemy wykryte przez zapach, wzrok lub dźwięk

Zapach rozpuszczalnika
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Przeciek Zobacz sekcję Przecieki
Rozlanie Sprawdź, czy pojemnik na odpady nie jest przepełniony lub zlokalizuj wyciek i posprzątaj
"Gorący" zapach
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Moduł przegrzewania Sprawdź, czy wentylacja jest prawidłowa, wyreguluj ją lub sprawdź ustawienie temperatury, wyreguluj lub wyłącz moduł, patrz instrukcja serwisowa
Nieprawidłowe odczyty liczników
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Nieprawidłowe ciśnienie Patrz rozdział Nieprawidłowe ciśnienie
Problem z piecem kolumnowym Sprawdź ustawienia i wyreguluj, patrz instrukcja serwisowa
Awaria lampy detektora Wymień lampę
Światła ostrzegawcze
Możliwa przyczyna rozwiązanie
Przekroczono limit ciśnienia Sprawdź, czy nie ma blokady lub sprawdź ustawienia limitów i dostosuj je
Inne lampy ostrzegawcze Patrz instrukcja obsługi/serwisu
Brzęczyki ostrzegawcze

podręcznik

Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Wyciek/rozlanie rozpuszczalnika Zlokalizuj i popraw
Inne brzęczyki ostrzegawcze Patrz instrukcja obsługi/serwisu
Piski i piski
Możliwa przyczyna Rozwiązanie
Awaria łożyska Zobacz instrukcję serwisową
Słabe smarowanie W razie potrzeby nasmaruj
Zużycie mechaniczne Zobacz instrukcję serwisową

Właściwości rozpuszczalników

Rozpuszczalnik Indeks polaryzacji Współczynnik załamania światła (20°C)

Odcięcie UV (nm)

(1 PLN)

Temperatura wrzenia (°C)

Lepkość

(mPa.s; 20 °C)

Mieszalność z wodą
Kwas octowy 6,2 1,372 230 118 1,26 100
Aceton 5.1 1359 330 56 0,32 100
Acetonitryl 5,8 1,344 190 82 0,37 100
Benzen 2,7 1501 280 80 0,65 0,18
Octan butylu 4.0 1,094 254 125 0,73 0,43
n-butanol 3,9 1,399 215 118 2,98 7,81
Tetrachlorek węgla 1,6 1466 263 77 0,97 0,08
Chloroform 4.1 1466 245 61 0,57 0,815
Cykloheksan 0,2 1426 200 81 1,00 0,01
Chlorek etylenu 3,5 1,444 225 84 0,79 0,81
Chlorek metylenu 3.1 1424 235 41 0,44 1,6
Dimetyloformamid 6,4 1,431 268 155 0,92 100
Dimetylosulfotlenek 7,2 1478 268 189 2.00 100
Dioksan 4,8 1422 215 101 1,54 100
Octan etylu 4.4 1,372 260 77 0,45 8,7
Etanol 5.2 1360 210 78 1,20 100
Eter dietylowy 2,8 1,353 220 35 0,32 6,89
Heptan 0.0 1,387 200 98 0,39 0,0003
Heksan 0.0 1,375 200 69 0,33 0,001
Metanol 5.1 1,329 205 65 0,60 100
Eter metylobutylowy 2,5 1,369 210 55 0,27 4,8
Keton metylowo-etylowy 4,7 1,379 329 80 0,45 24
Pentan 0.0 1,358 200 36 0,23 0,004
n-Propanol 4.0 1,384 210 97 2,27 100
izoPropanol 3,9 1,377 210 82 2.30 100
Eter diizopropylowy 2.2 1,368 220 68 0,37
Tetrahydrofuran 4.0 1407 215 65 0,55 100
Toluen 2,4 1496 285 111 0,59 0,051
Trichloroetylen 1,0 1477 273 87 0,57 0,11
Woda 9,0 1,333 200 100 1,00 100
Ksylen 2,5 1500 290 139 0,61 0,018

Zależność lepkości mieszaniny rozpuszczalników od jej składu procentowego

% Z wody Lepkość (MeOH/woda) Lepkość (ACN/woda)
0 0,65 0,35
10 0,95 0,50
20 1,20 0,55
30 1,60 0,70
40 1,75 0,80
50 1,90 0,90
60 1.80 1,00
70 1,75 1,05
80 1,65 1.10
90 1,40 1,05
100 1,00 1,00

Wykres

Szacowanie ciśnienia na kolumnach HPLC w zależności od wielkości cząstek, średnicy i długości kolumny

Wielkość cząstek (µm) ID (mm) Przepływ (ml/min)

Nacisk 150mm* (PSI)

Nacisk 250mm* (PSI)

3 4,6 0,5 – 1,0 1000 1500
5 3,0 0,4 – 0,8 750 1250
5 4,6 1,0 - 2,0 700 1100
5 10,0 5,0 - 10,0 750 1250
10 4,6 2,0 - 5,0 400 600
10 10,0 10,0 - 20,0 500 800
10 21,2 20,0 - 40,0 300 500

* Gdy natężenie przepływu mieści się w dolnych granicach zalecanych natężenia przepływu