Przyłączeniowy | Odcięcie UV (nm) |
Kwas octowy, 1% | 230 |
Octan amonu, 10 mM | 205 |
Węglan amonu, 10 mM | 190 |
Wodorofosforan amonu, 50 mM | 205 |
CAPS kwas 3-(cykloheksyloamino)etanosulfonowy, 0,1% | 215 |
EDTA, 1 mM | 190 |
Kwas solny, 0,1% | 190 |
Wodorofosforan wapnia, 10 mM | 190 |
Wodorofosforan wapnia, 10 mM | 190 |
MES Kwas 2-(N-morfolino)etanosulfonowy, pH 6,0, 10 mM | 215 |
Octan sodu, 10 mM | 205 |
cytrynian sodu, 10 mM | 225 |
Dodecylosiarczan sodu, 10 mM | 190 |
Mrówczan sodu, 10 mM | 200 |
Kwas heksanosulfonowy sodu, 5 mM | 225 |
TEA, (trietyloamina), 1% | 235 |
TFA (kwas trifluorooctowy), 0,1% | 190 |
Diwodorofosforan tetrabutyloamoniowy, 5 mM | 200 |
TRIS HCl (Tris(hydroksymetylo)aminometan), pH 7,0, 20 mM | 202 |
TRIS HCl (Tris(hydroksymetylo)aminometan), pH 8,0, 20 mM | 212 |
Konwersje jednostek on-line:
Wielkość cząstek (µm) | ID (mm) | Przepływ (ml/min) | Nacisk 150mm* (PSI) | Nacisk 250mm* (PSI) |
3 | 4,6 | 0,5 – 1,0 | 1000 | 1500 |
5 | 3,0 | 0,4 – 0,8 | 750 | 1250 |
5 | 4,6 | 1,0 - 2,0 | 700 | 1100 |
5 | 10,0 | 5,0 - 10,0 | 750 | 1250 |
10 | 4,6 | 2,0 - 5,0 | 400 | 600 |
10 | 10,0 | 10,0 - 20,0 | 500 | 800 |
10 | 21,2 | 20,0 - 40,0 | 300 | 500 |
* Gdy natężenie przepływu mieści się w dolnych granicach zalecanych natężenia przepływu
ID | Pływ | Kolor | Z |
0,13 mm | Do 2,0 ml/min | Czerwony | 1/16" |
0,18 mm | Do 5,0 ml/min | Żółty | 1/16" |
0,25 mm | Do 20 ml/min | Niebieski | 1/16" |
0,50 mm | Do 50 ml/min | Pomarańczowy | 1/16" |
0,75 mm | Do 100 ml/min | Zielony | 1/16" |
1,0 mm | Do 200 ml/min | Szary | 1/16" |
1,59 mm | Do 500 ml/min | 1/8"". | |
2,40 mm | Do 1000 ml/min | 1/8"". |
Cale do mm - cale x 25,4 = mm
Stopy na metr - stopy x 0,3048 = metr
Ciśnienie w kolumnie przy szybkości przepływu 1 ml/min
P = 2,1 xdx 10,13 xh / h 2 x vp 2
P – ciśnienie (MPa)
L – długość kolumny w mm
h - lepkość dynamiczna (dla wody = 1)
d – średnica wewnętrzna kolumny w mm
vp – wielkość cząstek w µm
Ciśnienie na kolumnie 4,6 x 250 mm, 5 um wyniesie ok. 100 barów przy szybkości przepływu 1,0 ml/min
ID (mm) | Wartość wtrysku (µl) | Pojemność kolumny (mg) | Przepływ (ml/min) |
4,6 | 5-100 | 1 | 0,5 - 2,0 |
10 | 100-1000 | 5 | 4,0 - 15,0 |
21,2 | 1000-5000 | 20 | 10 – 50 |
30 | 2000 – 10 000 | 40 | 40 – 100 |
50 | 5000 – 20 000 | 120 | 100-300 |
100 | 10 000 – 50 000 | 500 | 400–1000 |
pK oraz bufory kwasowe i zasadowe w HPLC do przygotowania fazy ruchomej
Bufor kwasowy | Temperatura (°C) | pK 1 | pK 2 | pK 3 | |
ACES kwas 2-[(2-amino-2-oksoetylo)amino]etanosulfonowy | 20 | 6,9 | - | - | |
Kwas octowy | 25 | 4,8 | - | - | |
Kwas borowy | 20 | 9,1 | 12,7 | 13,8 | |
CAPS kwas 3-(cykloheksyloamino)etanosulfonowy | 20 | 10,4 | - | - | |
Kwas cytrynowy | 25 | 3.1 | 4,8 | 6,4 | |
Kwas mrówkowy | 20 | 3,8 | - | - | |
Glicyna | 25 | 2,3 | 9,6 | - | |
Glicyloglicyna | 20 | 8.4 | - | - | |
HEPES Kwas N-2-hydroksyetylopiperazyno-N'-2-etanosulfonowy | 20 | 7,6 | - | - | |
imidazol | 20 | 7,0 | - | - | |
MES Kwas 2-(N-morfolino)etanosulfonowy | 20 | 6,2 | - | - | |
MOPS kwas 3-(N-morfolino)propanosulfonowy | 20 | 7,2 | - | - | |
Kwas szczawiowy | 25 | 1,3 | 4,3 | - | |
Kwas fosforowy | 25 | 2,1 | 7,2 | 12,7 | |
TES kwas 2-[tris(hydroksymetylo)metylo]aminoetanosulfonowy | 20 | 7,5 | - | - | |
Kwas trifluorooctowy | 25 | 0,3 | - | - | |
Tricyna N-[tris(hydroksymetylo)metylo]glicyna | 20 | 8,2 | - | - | |
TRIS Tris(hydroksymetylo)aminometan | 20 | 8,3 | - | - | |
pKb zasad w HPLC do przygotowania fazy ruchomej | |||||
Zaszczepiony bufor | temperatura (°C) | pK 1 | pK 2 | pK 3 | |
Amoniak | 25 | 9,3 | - | - | |
dietyloamina | 20 | 11.1 | - | - | |
dimetyloamina | 25 | 10,7 | - | - | |
Etyloamina | 20 | 10,8 | - | - | |
Etylenodiamina | 20 | 10.1 | 7,0 | - | |
metyloamina | 25 | 10,7 | - | - | |
Morfolina | 25 | 8,3 | - | - | |
trietyloamina (TEA) | 18 | 11,0 | - | - | |
trimetyloamina | 25 | 9,8 | - | - | |
Uwaga: Zakres pH, dla którego jest odpowiedni, mieści się w zakresie pK ± 1. Należy wziąć pod uwagę wartość odcięcia UV stosowanego buforu (tabela 2)
% wody | lepkość (MeOH / woda) | lepkość (AcCN / woda) |
---|---|---|
0 | 0,65 | 0,35 |
10 | 0,95 | 0,50 |
20 | 1,20 | 0,55 |
30 | 1,60 | 0,70 |
40 | 1,75 | 0,80 |
50 | 1,90 | 0,90 |
60 | 1,80 | 1,00 |
70 | 1,75 | 1,05 |
80 | 1,65 | 1.10 |
90 | 1,40 | 1,05 |
100 | 1,00 | 1,00 |
Wybór kapilary dla różnych prędkości przepływu
Dobór kolumny w zależności od wielkości natrysku i pojemności kolumny
Dodatek odcięcia UV dla faz mobilnych
pK i kwaśne bufory w fazach ruchomych do HPLC
pks zasady w fazie ruchomej do HPLC
Konwersja jednostek ciśnienia
Oszacowanie ciśnienia na kolumnach, w zależności od wielkości cząstek, średnicy i długości kolumny
Lepkość mieszanin rozpuszczalników
Właściwości rozpuszczalnika