Chromatografia

Inštalácia kapilárnych GC kolón

Stručný postup pri inštalácii kapilárnych GC kolón

• Vychlaďte všetky vyhrievané zóny GC
• Skontrolujte čističe plynov a v prípade potreby ich vymeňte
• Vyčistite injektor a detektor
• Vymeňte liner v injektore/detektore za nový
• Vymeňte dôležité tesnenia v injektore a detektore
• Vymeňte septum v injektore
• Nastavte prietok detektorových plynov
• Dôkladne skontrolujte kolónu, či nie je poškodená
• Nasaďte na každom konci kolóny maticu a ferulku
• Odrežte 10 centimetrov z každého konca kolóny. Na rezanie kremenných kolón použite zafírový nôž alebo keramickú doštičku. Na rezanie kovových kolón použite keramickú doštičku alebo hranatý pilník. Nástroje na rezanie kolón nájdete v našom katalógu.
• Zaveste kapilárnu kolónu na držiaky v termostate GC, aby nedošlo k jej poškodeniu
• Vložte požadovaný koniec kolóny do injektora. Správnou dĺžku nájdete v návode na obsluhu daného GC.
• Kolónu nainštalujte tak, aby sa nedotýkala stien termostatu
• Nastavte prietok kolónou v súlade s parametrami uvedenými v testovacom chromatograme výrobcu
• Nastavte splitový pomer, oplach septa a ďalšie parametre v súlade s požiadavkami výrobcu GC
• Uistite sa, že kolónou preteká nosný plyn. Ponorte voľný koniec kolóny do vialky s rozpúšťadlom (acetón alebo izopropanol).
• Vložte požadovaný koniec kolóny do detektora. Správnu dĺžku nájdete v návode na obsluhu daného GC.
• Skontrolujte tesnosť kolóny tepelno-vodivostným detektorom. Nepoužívajte mydlovú vodu alebo kvapalné detektory netesností, pretože môže dôjsť k poškodeniu kolóny.
• Nastavte teplotu injektora a detektora. Detektor zapnite po jeho stabilizácii. Upozornenie - dbajte na to, aby ste neprekročili maximálnu povolenou teplotu kolóny!
• Teraz nastavte správny mŕtvy objem (lineárnu rýchlosť) nastreknutím metánu alebo inej zlúčeniny, ktorá nie je kolónou zadržiavaná.
• Skontrolujte tvar píku, ktorý by mal byť symetrický
• Skondicionujte kolónu pri maximálnej teplote, až sa stabilizuje základná línia detektora (v testovacom chromatogramu kolóny nájdete maximálnu použitú teplotu).
• Nastavte teplotu termostatu a znovu nastreknite metán alebo inú, zlúčeninu, ktorá nie je kolónou zadržiavaná. Upravte podmienky pre optimálnu lineárnu rýchlosť.
• Nastreknite duplicitne testovaciu zmes kolóny a zistite, v akom stave sa nachádza kolóna a celý chromatografický systém
• Nakalibrujte prístroj a teraz môžete nastrekovať vzorky

Poznámka: Ak je kolóna nová, musíte previesť jej kondicionovanie skôr, ako budete nastavovať optimálny mŕtvy čas.

Kondicionování GC kolon

Kondicionování chromatografických kolon za zvýšené teploty bez průtoku nosného plynu trvale poškodí kolonu. V případě netěsnosti dojde k průniku kyslíku do kolony a při kondicionování za vyšší teploty dojde k jejímu trvalému poškození. Proto před započetím kondicionování:

• zkontrolujte správné nastavení prltoku kolonou
• proveďte kontrolu těstnosti abyste se vyvarovali přítomnosti kyslíku v chromatografickém systému

Kondicionování GC kolony:

• nainstalujte kolonu do injektoru. Kolonu nepřipojujte k detektoru (její konec nechte zajištěný uvnitř termostatu.
• nastavte počáteční teplotu termostatu GC na 40°C
• držte tuto teplotu po dobu 15
• nastavte teplotní gradient na 10°C/min
• nastavte maximální teplotu o 20°C nad maximální hodnotu teplotního programu, se kterým budete pracovat (maximální teplota musí být o 25°C nižší než je maximální povolená teplota GC kolony)*
• ponechejte kolonu při vysoké teplotě přes noc a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru. Je-li kolona před-kondicionovaná, ponechejte ji na maximální teplotě po dobu 2 hodin a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru.

^*Poznámka: Kondicionování přes noc není nutné u před-kondicionovaných kolon. Pečlivě si prostudujte návod dodávaný s kolonou, který má přednost před obecnými doporučeními uvedenými výše.

EasyFlash kolóny

Chromservis uviedol na trh nové kolóny EasyFlash pre vysoko účinnú flash chromatografiu. V tomto článku sa dozviete o výhodách flash chromatografia.

HPLC pripojenia (TN #539)

Táto technická poznámka ukazuje možné typy spojenia medzi stĺpom a LC systémom. Zlé pripojenie môže ovplyvniť oddelenie špičiek a je potrebné sa mu vyhnúť. Správne pripojenie je uvedené nižšie .

Ako pracuje trojitý kvadrupól?

Princíp trojnásobného kvadrupólu (TO) je vysvetlený na systéme EVOQ™ firmy Bruker. Kľúčové prvky systému sú tu:

• Axiálny iónový zdroj
• Aktívne zaostrenie iónov v Q1
• Iónová dráha bez iónovej optiky
• Kolízna cela s geometriou 180 °
• Eliptický dizajn
• Detektor umiestnený mimo os Q3

puriFlash

Flash kolóny puriFlash^®

Interchim vyvinul novú techniku pre chromatografiu - Ultra Performance Flash Purification (UPFP), ktorá využíva špeciálne flash kolónky, ktoré majú pravidelný alebo nepravidelný silikagél. UPFP umožňuje purifikovať zlúčeniny pri získaní vysokej čistoty výťažku a s menšou spotrebou rozpúšťadiel.

Preparatívne LC

Úlohy preparatívnych a analytických HPLC systémov sa od seba líšia. Zatiaľ čo úlohou analytickej HPLC je kvalitatívne a kvantitatívne stanovenie definovaných zlúčenín vo vzorkách, úlohou preparatívnej HPLC je separácia, vyčistenie a izolácia cenných produktov zo zmesí.

Preparatívnu chromatografiu je možné rozdeliť do troch základných oblastí:

• Flash chromatografia
• Semi-preparatívne separácia
• Vsádková preparatívna chromatografia (poloprevádzková alebo výrobná)
• "True Counter-current chromatography"
• " Simulated moving bed " (SMB)
• Kontinuálna chromatografia

Definícia rozsahu

Preparatívnu chromatografiu je možné kombnovať s Flash chromatografiou v jednom systéme - purifikačný chromatograf. Systém PuriFlash (Advion-Interchim) ponúka rôzne prevádzkové režimy:

• Preparative mód + Flash mód
• Dva Flash módy
• Dva preparatívne módy

Úvod

Aminokyseliny sú kľúčovými stavebnými kameňmi života a zohrajú dôležitú úlohu v rôznych metabolických dráhach. Väčšinou pôsobia ako medziprodukty, ktoré často priamo nezahŕňajú proteíny. Vzhľadom na ich chemickú zložitosť a dynamickú povahu je ich spoľahlivá kvantitatívna a kvalitatívna analýza v biologických tekutinách a tkanivách kľúčová pre nutričné informácie, identifikáciu zlúčenín a diagnostiku.

Na tento účel bola vyvinutá jednoduchá, elegantná a doteraz najrýchlejšia metóda na analýzu aminokyselín. Kit MetAmino^® na báze LC/GC-MS ponúka komplexné riešenie pre 75 metabolitov vrátane základných proteinogénnych aminokyselín, biogénnych amínov a koenzýmov s možnosťou ďalšieho rozšírenia analytov.

Vlastnosti

• V zásade vhodný pre akékoľvek matrice (moč, krvné sérum, slzy, mozgová tekutina, tkanivové extrakty, pôdne extrakty atď.)
• Jednoduchá príprava vzorky
• Derivatizácia a analýza vzorky do 20 minút
• Široké portfólio analytov (75) s možnosťou ďalšieho rozšírenia
• Nie je potrebné zahrievanie/zmrazovanie vzorky
• Knižnica NIST pre GC/MS je k dispozícii
• Možnosť analyzovať látky s nízkou molekulovou hmotnosťou, ktoré môžu byť degradované v iónovom zdroji (napr. GLY, ALA atď.)
• Vhodné na analýzu látok, ktoré sa ťažko kvantifikujú, ako sú polyamíny
• Súčasťou sú všetky potrebné chemikálie, príslušenstvo, HPLC kolóna a návod na derivatizáciu a analýzu s vysokou presnosťou a citlivosťou

Povolené úpravy metód HPLC

Rozsah, v akom je možné upraviť rôzne parametre chromatografického testu bez zásadnej úpravy liekopisných analytických postupov, je uvedený v tejto technickej poznámke. Iné zmeny, ako sú uvedené, vyžadujú predĺženie platnosti postupu.