0 Porovnať
Pridajte si do porovnania produkty pomocou ikonky váh a tu si potom môžete porovnať ich parametre.
Užívateľ
0 Košík
Váš košík je prázdny...

HPLC závady a jejich odstranění

Abnormálny tlak

Žiadne meranie tlaku, žiadny prietok
Možná príčina Riešenie
Vypnúť Zapnite napájanie
Vypálená poistka Vymeňte poistku
Nastavenie alebo porucha ovládača Skontrolujte správne nastavenia, opravte alebo vymeňte ovládač
Zlomený piest Vymeňte piest
Vzduch zachytený v hlave čerpadla Odplyňte mobilnú fázu, vypustite vzduch z čerpadla a naplňte čerpadlo
Nedostatočná mobilná fáza Doplňte zásobník, vymeňte vstupnú fritu, ak je zablokovaná
Chybné spätné ventily Vymeňte spätné ventily
Veľký únik Dotiahnite alebo vymeňte armatúry
Pomoc Teraz odčítaný tlak, prietok je normálny
Možná príčina Riešenie
Chybný merač Vymeňte merač
Chybný prevodník tlaku Vymeňte prevodník

Vysoký protitlak
Možná príčina Riešenie
Prietok nastavený príliš vysoko Upravte nastavenia
Blokovaná stĺpcová frita Prepláchnite kolónu, ak je to povolené, vymeňte fritu podľa pokynov výrobcu a záručných podmienok alebo kolónu vymeňte
Nesprávna mobilná fáza, vyzrážaný pufor Použite správnu mobilnú fázu, premyte kolónu
Nesprávny stĺpec Použite správny stĺpec
Zablokovanie vstrekovača Odstráňte zablokovanie alebo vymeňte vstrekovač
Teplota kolóny je príliš nízka Zvýšte teplotu
Porucha ovládača Opravte alebo vymeňte ovládač
Zablokovaný ochranný stĺp Odstráňte/vymeňte ochranný stĺpik
Zablokovaný in-line filter Odstráňte/vymeňte in-line filter

Mali by ste zistiť, čo spôsobilo vysoký protitlak - stĺpik alebo systém? Odporúčame nasledovný postup:

Odstráňte kolónu zo systému a zapnite čerpadlo. Ak sa stále objaví vysoký protitlak, potom je zablokovanie v systéme:

  • zablokované alebo zvlnené potrubie
  • špinavá frita čerpadla
  • alebo upchatý vstrekovací ventil

Ak je tlak normálny, je problém so stĺpcom:

  • upchatý alebo poškodený predkolónový filter, ochranná kolóna alebo frita
  • zrážanie vzorky alebo pufra v kolóne
Nízky protitlak

tlak

Možná príčina Riešenie
Prietok nastavený príliš nízko Upravte prietok
Únik v systéme Nájdite a opravte
Nesprávny stĺpec Použite správny stĺpec
Teplota kolóny je príliš vysoká Nižšia teplota
Porucha ovládača Opravte alebo vymeňte ovládač
Kolísavý tlak

Pozrite si časť Vysoký protitlak .

Tlak klesá na nulu

Pozrite si časti Žiadny údaj tlaku, žiadny prietok a Žiadny údaj tlaku, prietok je normálny

Tlak klesá, ale nie na nulu

Pozrite si časť Nízky tlak

Cyklovanie tlaku
Možný prípad Riešenie
Vzduch v čerpadle Odplyňte rozpúšťadlo a/alebo vypustite vzduch z čerpadla
Chybný spätný ventil(y) Vymeňte spätný ventil(y)
Porucha tesnenia čerpadla Vymeňte tesnenie čerpadla
Nedostatočné odplynenie Odplyňte rozpúšťadlo a/alebo zmeňte metódy odplyňovania (napr. použite vákuový odplyňovač)
Únik v systéme Nájdite únik a opravte ho
Použitie gradientovej elúcie Cyklovanie tlaku je normálne v dôsledku zmeny viskozity

Netesnosti

Úniky sa zvyčajne zastavia dotiahnutím alebo výmenou armatúry. Uvedomte si však, že príliš utiahnuté kovové kompresné armatúry môžu presakovať a plastové tesniace armatúry sa môžu opotrebovať. Ak netesnosť armatúry neprestane ani po miernom utiahnutí armatúry, armatúru rozoberte a skontrolujte, či nie je poškodená (napr. zdeformovaná objímka alebo častice na tesniacej ploche). Ak je armatúra alebo objímka poškodená, vymeňte ju za novú.

Netesné armatúry

Možná príčina Riešenie
Voľná montáž Utiahnite armatúru
Odizolovaná armatúra Vymeňte armatúru
Príliš utiahnuté kovanie Uvoľnite a znova utiahnite armatúru. Ak je armatúra poškodená, vymeňte ju.
Špinavá armatúra Demontujte armatúru a vyčistite ju. Ak je armatúra poškodená, vymeňte ju.
Nezhodné diely Používajte všetky diely rovnakej značky/typu.
Netesnosti na čerpadle
Možná príčina Riešenie
Uvoľnené spätné ventily Utiahnite spätný ventil (neuťahujte príliš) alebo vymeňte spätný ventil
Voľné kovanie Utiahnite armatúry (neuťahujte príliš)
Porucha tesnenia mixéra Opravte alebo vymeňte
Porucha tesnenia čerpadla Opravte alebo vymeňte tesnenie
Porucha tlmiča impulzov Vymeňte tlmič impulzov
Porucha proporcionálneho ventilu Skontrolujte membrány, vymeňte ich, ak sú netesné a/alebo skontrolujte, či nie sú poškodené, vymeňte ich
Preplachovací ventil Utiahnite ventil alebo ho vymeňte, ak je chybný
Netesnosti vstrekovača
Možná príčina Riešenie
Porucha tesnenia rotora Prestavte alebo vymeňte rotor
Blokovaná slučka Vyčistite alebo vymeňte slučku
Uvoľnené tesnenie portu vstrekovača Upraviť
Nesprávny priemer ihly injekčnej striekačky Použite správnu injekčnú striekačku
Odpadové vedenie sifónu Odpadové vedenie udržujte nad povrchom rozsiahle, so správnym sklonom
Blokovanie odpadového potrubia Vymeňte odpadové vedenie
Netesnosti kolóny

otaznik

Možná príčina Riešenie
Voľná koncovka Utiahnite koncovú armatúru
Balenie stĺpika v objímke Demontujte, opláchnite objímku a znova zložte
Nesprávna hrúbka frity Použite správnu fritu (*)

*Poznámka: Ak je veľkosť častíc stacionárnej fázy 3 až 4 µm, použite fritu 0,5 µm. Ak je veľkosť častíc stacionárnej fázy 5 až 20 µm, použite fritu 2 µm.

Dead volume

Netesnosti detektora
Možná príčina Riešenie
Porucha tesnenia článku Zabráňte nadmernému spätnému tlaku alebo vymeňte tesnenie
Prasknuté okienka bunky Nahradiť okná bunky
Netesné armatúry Dotiahnite alebo vymeňte armatúry
Zablokované vedenie odpadu Vymeňte odpadové vedenie
Blokujte prietokovú bunku Prestavte alebo vymeňte prietokovú celu

Problémy s chromatogramom

Mnoho problémov v systéme LC sa javí ako zmeny v chromatograme. Niektoré z nich možno vyriešiť zmenami v prístroji, iné problémy si však vyžadujú úpravu postupu testu. Nastavenie správneho typu kolóny, predkolóna alebo ochrannej kolóny, hadičky, detekčná cela a mobilná fáza sú kľúčom k dobrej chromatografii .

Vrcholový chvost

Vrcholový chvost

Možná príčina Riešenie
Zablokovaná frita Obráťte preplach kolóny (ak je to povolené) alebo vymeňte fritu (ak je to povolené) alebo vymeňte kolónu
Stĺpec je neplatný Vyplňte prázdnotu
Rušivý vrchol Použite dlhšiu kolónu alebo zmeňte mobilnú fázu a/alebo selektivitu kolóny
Nesprávne pH mobilnej fázy Upravte pH. Pre zásadité zlúčeniny poskytuje nižšie pH zvyčajne symetrickejšie píky
Ukážka reakcie s aktívnymi miestami Pridajte iónové párové činidlo alebo prchavý základný modifikátor alebo vymeňte kolónu
Peak fronting

Peak fronting

Možná príčina Riešenie
Nízka teplota Zvýšte teplotu kolóny
Nesprávne rozpúšťadlo vzorky Na injekčné rozpúšťadlo použite mobilnú fázu
Preťaženie vzorky Znížte koncentráciu vzorky
Zlý stĺpec Obráťte preplach kolóny (ak je to povolené) alebo vymeňte vstupnú fritu (ak je to povolené) alebo vymeňte kolónu.
Rozdelené vrcholy

Rozdelené vrcholy

Možná príčina Riešenie
Kontaminácia na vstupe ochrannej alebo analytickej kolóny Odstráňte ochranný stĺpec a skúste analýzu. v prípade potreby vymeňte ochranný stĺpik. Ak je analytická kolóna upchatá, obráťte sa a prepláchnite (ak je to povolené). Ak problém pretrváva, kolóna môže byť znečistená silne zadržiavanými kontaminantmi. Použite vhodný postup obnovy (pozri informácie o starostlivosti o stĺpec). Ak problém pretrváva, prívod je pravdepodobne upchatý. Vymeňte fritu alebo vymeňte kolónu.
Vzorka rozpúšťadla nekompatibilná s mobilnou fázou Vymeňte rozpúšťadlo. vždy, keď je to možné, vstrekujte vzorky v mobilnej fáze.
Skreslenie väčších vrcholov

Maximálne skreslenie môže byť spôsobené preťažením vzorky. Znížte veľkosť vzorky.

Skreslenie skorých vrcholov

Skreslenie skorých eluujúcich píkov môže byť spôsobené nesprávnym vstrekovacím rozpúšťadlom. Znížte objem injekcie alebo použite slabšie injekčné rozpúšťadlo.

Chvost, skoré vrcholy viac ako neskoršie
Možná príčina Riešenie
Extra-stĺpcové efekty Prepojte systém (kratšie, užšie hadičky), použite detekčnú celu s menším objemom
Zvýšený chvost so zvyšovaním k'
Možná príčina Riešenie
Sekundárne retenčné účinky, režim s reverznou fázou Pridajte trietylamín (základné vzorky) alebo pridajte acetát (kyslé vzorky) alebo pridajte soľ alebo pufor (iónové vzorky) alebo skúste inú kolónu.
Sekundárne retenčné účinky, režim normálnej fázy Pridajte trietylamín (zásadité zlúčeniny) alebo pridajte kyselinu octovú (kyslé zlúčeniny) alebo pridajte vodu (polyfunkčné zlúčeniny). Len pre metódy normálnej fázy, ktoré používajú rozpúšťadlá miešateľné s vodou. Môžete tiež vyskúšať inú metódu LC.
Sekundárne retenčné účinky, iónovo-párová chromatografia Pridajte trietylamín (základné vzorky)
Kyslé alebo zásadité vrcholy chvosta
Možná príčina Riešenie
Nedostatočné ukladanie do vyrovnávacej pamäte Použite 50 až 100 mM koncentráciu pufra, použite pufor s pKa rovným pH mobilnej fázy
Extra vrcholy
Možná príčina Riešenie
Vrcholy duchov Nečistoty vo vzorke, použité činidlá alebo materiál. Zmeňte postup čistenia a/alebo skontrolujte možný zdroj kontaminácie (sklo, liekovky, použité činidlá, rozpúšťadlá atď...)
Neskorý eluujúci pík z predchádzajúcej injekcie Zvýšte čas chodu alebo sklon sklonu a/alebo zvýšte prietok
Posuny retenčného času

hodiny

Možná príčina Riešenie
Slabá regulácia teploty Použite stĺpový termostat. Ak ho používate, skontrolujte jeho správnu funkčnosť.
Zmena mobilnej fázy Zabráňte zmenám (vyparovanie, reakcia, atď.)
Slabá ekvilibrácia kolóny Medzi cyklami nechajte viac času na ekvilibráciu kolóny
Náhle zmeny retenčného času
Možná príčina Riešenie
Zmena prietoku Obnovte prietok
Vzduchová bublina v čerpadle Vypustite vzduch z čerpadla
Nesprávna mobilná fáza Vymeňte mobilnú fázu za správnu a/alebo nastavte správnu zmes mobilnej fázy na ovládači
Posun základnej čiary
Možná príčina Riešenie
Kolísanie teploty stĺpca. Aj malé zmeny spôsobujú cyklický rast a pokles základnej línie. Najčastejšie ovplyvňuje index lomu, UV a detektory vodivosti pri vysokej citlivosti Kontrolujte teplotu kolóny a mobilnej fázy, pred detektorom použite výmenník tepla
Nehomogénna mobilná fáza. Posun základnej línie je zvyčajne spôsobený vyššou absorbanciou, a nie cyklickým vzorom z kolísania teploty. Používajte rozpúšťadlá, vysoko čisté soli a aditíva HPLC. Mobilnú fázu pred použitím odplynite, počas používania prepláchnite héliom.
Nahromadenie nečistôt alebo vzduchu v detekčnej cele Prepláchnite celu metanolom alebo iným silným rozpúšťadlom. V prípade potreby vyčistite celu 1N HNO 3 (nikdy nepoužívajte HCl).
Zastrčená zásuvka za detektorom. Vysoký tlak poškodzuje bunkové vetranie a vytvára hlučnú základnú líniu. Odpojte alebo vymeňte vedenie. Informácie o výmene okna nájdete v príručke k detektoru.
Problém s miešaním mobilnej fázy alebo zmena prietoku Správne zloženie alebo prietok. Aby ste predišli tomuto problému, pravidelne monitorujte zloženie a prietok.
Pomalá ekvilibrácia kolóny, najmä pri zmene mobilnej fázy Pred analýzou prepláchnite stredne silným rozpúšťadlom, napustite 10 až 20 objemov kolóny novej mobilnej fázy
Mobilná fáza je kontaminovaná, znehodnotená alebo pripravená z materiálov nízkej kvality Príprava mobilnej fázy Chack. Používajte chemikálie najvyššej kvality a rozpúšťadlá pre HPLC
Silne zadržané materiály vo vzorke (vysoké k') sa môžu eluovať ako veľmi široké píky a javia sa ako stúpajúca základná línia (analýzy gradientu môžu zhoršiť problém). Použite ochranný stĺp. Ak je to potrebné, prepláchnite kolónu silným rozpúšťadlom medzi injekciami alebo pravidelne počas analýzy.
Mobilná fáza je recyklovaná, ale detektor nie je nastavený Obnoviť základnú líniu. Pri prekročení dynamického rozsahu detektora použite novú mobilnú fázu.
Detektor (UV) nie je nastavený na maximum absorbancie, ale na sklon krivky Zmeňte vlnovú dĺžku na maximum UV absorbcie
Základný hluk (pravidelný)
Možná príčina Riešenie
Vzduch v mobilnej fáze, detekčná bunka alebo čerpadlo Odplynenie mobilnej fázy. Preplachovací systém na odstránenie vzduchu z detekčnej bunky alebo čerpadla.
Únik Pozrite si časť Netesnosti . Skontrolujte, či systém nie je uvoľnený. Skontrolujte, či čerpadlo tesní, nehromadí sa soľ, či nie je nezvyčajný hluk. V prípade potreby vymeňte tesnenia čerpadla.
Neúplné premiešanie mobilnej fázy Mobilnú fázu premiešajte ručne alebo použite menej viditeľnú vzorku.
Vplyv teploty (stĺpec pri vysokej teplote alebo nevyhrievaný detektor) Znížte diferenciál alebo pridajte výmenník tepla
Ostatné elektronické zariadenia na tej istej linke izolujte LC, detektor alebo rekordér/PC, aby ste zistili, či je zdroj problému externý. Opravte podľa potreby.
Pulzácia čerpadla Začleniť do systému tlmič impulzov.
Základný hluk (nepravidelný)
Možná príčina Riešenie
Únik Pozrite si časť Netesnosti . Skontrolujte, či systém nie je uvoľnený. Skontrolujte, či čerpadlo tesní, nehromadí sa soľ, či nie je nezvyčajný hluk. V prípade potreby vymeňte tesnenia čerpadla.
Mobilná fáza je kontaminovaná, znehodnotená alebo pripravená z materiálov nízkej kvality Skontrolujte prípravu mobilnej fázy
Rozpúšťadlá mobilnej fázy nemiešateľné Vyberajte a používajte iba miešateľné rozpúšťadlá
Vzduch zachytený v systéme Prepláchnite systém silným rozpúšťadlom
Vzduchové bubliny v detektore Detektor čistenia. Za detektorom nainštalujte protitlakové zariadenie
Elektronika detektora/rekordéra Elektronicky izolujte detektor a záznamník/PC. Ak chcete problém vyriešiť, pozrite si návod na obsluhu.
Detektor je kontaminovaný (aj malé množstvo nečistôt môže spôsobiť hluk) Vyčistite celu prepláchnutím 1N HNO 3 (nikdy nepoužívajte HCl)
Slabá detektorová lampa Vymeňte lampu
Kolóna presakuje oxid kremičitý alebo obalový materiál Vymeňte stĺpec
Nedostatočný alebo nefunkčný mixér mobilnej fázy Opravte alebo vymeňte mixér alebo mixujte off-line, ak je izokratický.
Široké vrcholy
Možná príčina Riešenie
Zloženie mobilnej fázy sa zmenilo Pripravte novú mobilnú fázu
Prietok mobilnej fázy je príliš nízky Upravte prietok
Netesnosti (najmä medzi kolónou a detektorom) Pozrite si časť Netesnosti . Skontrolujte, či systém nie je uvoľnený. Skontrolujte, či čerpadlo tesní, nehromadí sa soľ, či nie je nezvyčajný hluk. V prípade potreby vymeňte tesnenia čerpadla.
Nastavenia detektora sú nesprávne Upravte nastavenia
Koncentrácia pufra je príliš nízka Zvýšte koncentráciu pufra
Ochranný stĺp je kontaminovaný/opotrebovaný Vymeňte ochranný stĺpik
Stĺpec je znečistený/opotrebovaný. Nízke registračné číslo. Vymeňte stĺpec za nový rovnakého typu.
Prázdno na vstupe do kolóny Otvorte vstupný koniec a vyplňte medzeru alebo vymeňte kolónu
Pík predstavuje dve alebo viac zle rozlíšených zlúčenín Zmeňte typ stĺpca, aby ste zlepšili separáciu
Teplota kolóny je príliš nízka Zvýšte teplotu. Neprekračujte 60°C, pokiaľ vyššie teploty nie sú prijateľné pre výrobcu kolóny.
Časová konštanta detektora je príliš veľká Použite menšiu časovú konštantu

chróm Široké vrcholy môžu byť spôsobené efektmi mimo stĺpca:

  • Kolóna je preťažená - vstreknite menší objem (napr. 10 µl namiesto 100 µl) alebo zriedte vzorku
  • Čas odozvy detektora alebo príliš veľký objem bunky – skráťte čas odozvy alebo použite menšiu bunku
  • Hadička medzi kolónou a detektorom je príliš dlhá, vnútorný priemer je príliš veľký – použite čo najkratší kus hadičky s vnútorným priemerom 0,007" až 0,010" (UHPLC techniky vyžadujú použitie hadičky s vnútorným priemerom 0,005")
  • Čas odozvy rekordéra je príliš vysoký – Skráťte čas odozvy
Strata rozlíšenia
Možná príčina Riešenie
Mobilná fáza je kontaminovaná (znehodnotená (spôsobuje zmenu retenčného času) Pripravte novú mobilnú fázu
Upchatá ochranná alebo analytická kolóna Odstráňte ochranný stĺpec a vykonajte analýzu. V prípade potreby vymeňte kryt. Ak je analytická kolóna upchatá, otočte ju a prepláchnite. Ak problém pretrváva, kolóna môže byť znečistená silne zadržiavanými kontaminantmi. Použite vhodný postup obnovy podľa návodu výrobcu. Ak problém pretrváva, prívod je pravdepodobne upchatý. Vymeňte fritu alebo vymeňte kolónu.
Všetky vrcholy sú príliš malé
Možná príčina Riešenie
Útlm detektora je príliš vysoký Znížte útlm
Časová konštanta detektora je príliš veľká Použite menšiu časovú konštantu
Veľkosť injekcie je príliš malá Zvýšte koncentráciu vzorky alebo zvýšte vstrekovací objem, ak to veľkosť kolóny umožňuje
Nesprávne pripojenie rekordéra Použite správne pripojenie
Všetky vrcholy sú príliš veľké
Možná príčina Riešenie
Útlm detektora je príliš nízky Použite väčší útlm
Veľkosť injekcie je príliš veľká Znížte koncentráciu vzorky alebo znížte vstrekovací objem, použite menšiu vzorkovú slučku alebo použite čiastočné plnenie slučky
Nesprávne pripojenie rekordéra Použite správne pripojenie

Problémy s injektorom

Manuálny vstrekovač, ťažko sa otáča
Možná príčina Riešenie
Poškodené tesnenie rotora Prerobte alebo vymeňte tesnenie/ventil
Príliš tesný rotor Upravte napnutie rotora
Manuálny vstrekovač, ťažko sa napĺňa

náradie

Možná príčina Riešenie
Nesprávne nastavený ventil Upravte zarovnanie
Blokovaná slučka Vymeňte slučku
Špinavá injekčná striekačka Vyčistite alebo vymeňte injekčnú striekačku
Zablokované linky Vyčistite alebo vymeňte riadky
Injektor automatického odberu vzoriek – neotáča sa
Možná príčina Riešenie
Žiadny tlak vzduchu alebo výkon Dodajte správny tlak/výkon
Príliš tesný rotor Upraviť
Nesprávne nastavený ventil Upravte zarovnanie
Autosampler - iné problémy
Možná príčina Riešenie
Blokovanie Vyčistite alebo vymeňte zablokovanú časť
Zaseknutý mechanizmus Pozrite si servisnú príručku
Chybný ovládač Opravte alebo vymeňte ovládač

Problémy zistené čuchom, zrakom alebo zvukom

Zápach rozpúšťadla
Možná príčina Riešenie
Únik Pozrite si časť Netesnosti
vyliať Skontrolujte, či nepreteká nádoba na odpad alebo nájdite rozliatu a vyčistite ju
"Horúca" vôňa
Možná príčina Riešenie
Modul prehrievania Skontrolujte správne vetranie, upravte ho alebo skontrolujte nastavenie teploty, nastavte alebo vypnite modul, pozrite si servisnú príručku
Abnormálne údaje z merača
Možná príčina Riešenie
Abnormality tlaku Pozrite si časť Abnormálny tlak
Problém so stĺpovou rúrou Skontrolujte nastavenia a upravte ich, pozrite si servisnú príručku
Detektorová lampa zlyhá Vymeňte lampu
Výstražné svetlá
Možná príčina Riešenie
Prekročený tlakový limit Skontrolujte zablokovanie alebo skontrolujte nastavenia limitov a upravte ich
Ďalšie výstražné kontrolky Pozrite si návod na obsluhu/servis
Výstražné bzučiaky

Manuálny

Možná príčina Riešenie
Únik/rozliatie rozpúšťadla Nájdite a opravte
Ďalšie varovné bzučiaky Pozrite si návod na obsluhu/servis
Vŕzganie a škrípanie
Možná príčina Riešenie
Porucha ložiska Pozrite si servisnú príručku
Slabé mazanie Namažte podľa potreby
Mechanické opotrebovanie Pozrite si servisnú príručku