Rady a tipy

Instalace kapilárních GC kolon

Stručný postup při instalaci kapilárních GC kolon

• Vychlaďte všechny vyhřívané zóny GC
• Zkontrolujte čističe plynů a v případě potřeby je vyměňte
• vyčistěte injektor a detektor
• Vyměňte liner v injektoru/detektoru za nový
• Vyměňte důležitá těsnění v injektoru a detektoru
• Vyměňte septum v injektoru
• Nastavte průtok detektorových plynů
• Pečlivě zkontrolujte kolonu, není-li poškozená
• Nasaďte na každém konci kolony matici a ferulku
• Uřízněte 10 centimetrů z každého konce kolony. K řezání křemenných kolon použijte safírový nůž nebo keramickou destičku. K řezání kovových kolon použijte buďto keramickou destičku nebo hranatý pilník. Nástroje pro řezání kolon najdete v našem katalogu.
• Zavěste kapilární kolonu na držáky v termostatu GC, aby nedošlo k jejímu poškození
• Vložte požadovaný konec kolony do injektoru. Správnou délku najdete v návodu pro obsluhu daného GC.
• Kolonu nainstalujte tak, aby se nedotýkala stěn termostatu
• Nastavte průtok kolonou v souladu s parametry uvedenými v testovacím chromatogramu výrobce
• Nastavte splitový poměr, oplach septa a další parametry v souladu s požadavky výrobce GC
• Ujistěte se, že kolonou protéká nosný plyn. Ponořte volný konec kolony do vialky s rozpouštědlem (aceton nebo isopropanol).
• Vložte požadovaný konec kolony do detektoru. Správnou délku najdete v návodu pro obsluhu daného GC.
• Zkontrolujte těsnost kolony tepelně vodivostním detektorem. Nepoužívejte mýdlovou vodu nebo kapalné detektory netěsností, protože může dojít k poškození kolony.
• Nastavte teplotu injektoru a detektoru. Detektor zapněte po jeho stabilizaci. Upozornění - dbejte na to, abyste nepřekročili maximální povolenou teplotu kolony!
• Nyní nastavte správný mrtvý objem (lineární rychlost) nastříknutím metanu nebo jiné sloučeniny, která není kolonou zadržována.
• Zkontrolujte tvar píku, který by měl být symetrický
• Zkondicionujte kolonu při maximální teplotě, až se stabilizuje základní linie detektoru (v testovacím chromatogramu kolony najdete maximální použitou teplotu).
• Nastavte teplotu termostatu a znovu nastříkněte metan nebo jinou, sloučeninu, která není kolonou zadržována. Upravte podmínky pro optimální lineární rychlost.
• Nastříkněte duplicitně testovací směs kolony a zjistěte, v jakém stavu se nachází kolona a celý chromatografický systém
• Nakalibrujte přístroj a nyní můžete nastřikovat vzorky

Poznámka: Je-li kolona nová, musíte provést její kondicionování dříve, než budete nastavovat optimální mrtvý čas.

Kondicionování GC kolon

Kondicionování chromatografických kolon za zvýšené teploty bez průtoku nosného plynu trvale poškodí kolonu. V případě netěsnosti dojde k průniku kyslíku do kolony a při kondicionování za vyšší teploty dojde k jejímu trvalému poškození. Proto před započetím kondicionování:

• zkontrolujte správné nastavení prltoku kolonou
• proveďte kontrolu těstnosti abyste se vyvarovali přítomnosti kyslíku v chromatografickém systému

Kondicionování GC kolony:

• nainstalujte kolonu do injektoru. Kolonu nepřipojujte k detektoru (její konec nechte zajištěný uvnitř termostatu.
• nastavte počáteční teplotu termostatu GC na 40°C
• držte tuto teplotu po dobu 15
• nastavte teplotní gradient na 10°C/min
• nastavte maximální teplotu o 20°C nad maximální hodnotu teplotního programu, se kterým budete pracovat (maximální teplota musí být o 25°C nižší než je maximální povolená teplota GC kolony)*
• ponechejte kolonu při vysoké teplotě přes noc a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru. Je-li kolona před-kondicionovaná, ponechejte ji na maximální teplotě po dobu 2 hodin a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru.

^*Poznámka: Kondicionování přes noc není nutné u před-kondicionovaných kolon. Pečlivě si prostudujte návod dodávaný s kolonou, který má přednost před obecnými doporučeními uvedenými výše.

Připojení HPLC (TN #539)

Tato technická poznámka ukazuje možné typy spojení mezi sloupem a LC systémem. Špatné připojení může ovlivnit oddělení špiček a je třeba se mu vyhnout. Správné zapojení je uvedeno níže .

Přípustné úpravy metod HPLC

V této technické poznámce jsou uvedeny HPLC kolony Chromservis odpovídající USP metodám a rozsah, v jakém lze různé parametry chromatografického testu upravit bez zásadních změn lékopisných analytických postupů. Jiné než uvedené změny vyžadují revalidaci postupu.

JAK SPRÁVNĚ UZAVÍRAT KRIMPOVACÍ VIALKY

Krimpovací vialky jsou výbornou vzorkovnicí pro automatické dávkovače plynových a kapalinových chromatografů a pro skladování vzorků nebo kalibračních roztoků. Technika jejich uzavírání je velmi důležitá pro správnou těsnost. Díky netěsnosti způsobené nesprávným uzavřením, může dojít k odpaření rozpouštědla nebo ke ztrátě analytů.
Správně uzavřená vialka se pozná podle toho, že se její víčko po uzavření protáčí ztěžka a septum je rovné.
Vialka, která je uzavřená příliš velkou silou se pozná podle toho, že jejím víčkem nelze zpravidla vůbec otáčet a navíc má prohnuté septum (směrem dovnitř). Dojde-li k propíchnutí septa jehlou mikrostříkačky, dojde k velkému namáhání septa a tím k narušení těsnosti vialky.
Vialka, která nemá správně uzavřené víčko, díky malé síle krimpovacích kleští, se projevuje snadným otáčením víčka a v některých případech i neobepnutým hliníkovým materiálem kolem spodního okraje límce vialky.
Správnou sílu uzavíracích kleští můžete nastavit.
U starších typů kleští se nastavení síly provádí otáčením imbusového klíče uvnitř čelistí. Kleště mívají i dorazový šroub, kterým se nastavuje bezpečnostní vzdálenost, aby nedošlo k použití příliš vysoké síly a tím k netěsnosti nebo dokonce k mechanickému poškození vialky.

Závady a jejich odstranění

Většině problémů u GC a LC přístrojů lze předejít prováděním pravidelné preventivní údržby. Pokud hledáte příčinu chromatografického problému, vždy postupujte krok za krokem. Nikdy neprovádějte změnu více parametrů najednou, protože nebudete vědět, která ze změn měla vliv na výsledek chromatografické analýzy. .

Zde si můžete zvolit oblast chromatografie, ve které hledáte tipy pro odstranění závad:

GC troubleshooting

LC troubleshooting

Zvýšení poměru signál/šum v plynové chromatografii

Dnešní potřeby laboratoří jsou:

• nižší meze detekce a kvantifikace (LOD, LQD)
• zvýšení stability GC a GC/MS systémů
• vyšší inertnost a stabilita GC komponent (kolony, septa, vialky, linery, ...)

Nižší mez detekce a kvantifikace je možné dosáhnout:

• snížením šumu
• zvýšením signálu

Výběr vhodného septa pro GC

GC Agilent

GC DANI

GC Perkin-Elmer

GC Shimadzu

GC Varian

GC Thermo Scientific

Mikrostříkačky

Čištění mikrostříkaček a jejich údržba

Chromatografické stříkačky jsou velmi přesné a kvalitní dávkovače mikrolitrových množství kapalin. Přesto se jedná o výrobky, o které je potřeba se dobře starat. Tím zajistíte jejich dlouhou životnost a zkvalitníte dávkování vašich vzorků do chromatografů.

Některá rozpouštědla, jako např. halogenované uhlovodíky, mohou poškodit vysoce odolné lepidlo (cementované části) fixující jehlu k tělu mikrostříkačky. To může vést k zatuhnutí pístu nebo ucpání jehly.

Čištění skleněného těla stříkačky

Stříkačky Hamilton a SGE je nejlepší čistit rozpouštědlem se známou solvatační schopností, aby se nejlépe odstranily zbytky vzorků. Při čištění upřednostněte rozpouštědla neobsahující alkálické sloučeniny, fosfáty nebo detergenty. Hamilton nabízí čistící roztok schopný biodegradace (katalogové číslo 18311).

Stříkačku (vnitřní prostor skleněného těla) opláchněte nejprve deionizovanou vodou, acetonem nebo jiným rozpouštědlem rozpustným ve vodě (např. metanolem). Následně opláchněte stříkačku hexanem a vysušte. Vyvarujte se dlouhodobého ponoření stříkačky v čistícím roztoku.

Stříkačky MICROLITER™ (řada 600, 700, 800 a 900)

• Opláchněte stříkačku rozpouštědlem, které nejlépe rozpouští rezidua vzorku.
• Vyjměte píst z těla stříkačky a jemně ho otřete hadříkem, který neuvolňuje vlákna (ideální je hadřík namočený ve zvoleném rozpouštědle). vložte píst zpět do těla stříkačky a nasajte/vypusťte několikrát za sebou deionizovanou vodu. Postup opakujte s acetonem nebo metanolem a nakonec hexanem nebo obdobným nepolárním rozpouštědlem.
• Stříkačku vysušte.
• Pracujete-li s roztoky solí, doporučujeme skladovat stříkačku s vytáhnutým pístem.

Stříkačky GASTIGHT® (řada 1000, 1700 a 1800)

• Opláchněte stříkačku rozpouštědlem, které nejlépe rozpouští rezidua vzorku.
• Vyjměte píst z těla stříkačky a jemně ho otřete hadříkem, který neuvolňuje vlákna (ideální je hadřík namočený ve zvoleném rozpouštědle). vložte píst zpět do těla stříkačky a nasajte/vypusťte několikrát za sebou deionizovanou vodu. Postup opakujte s acetonem nebo metanolem a nakonec hexanem nebo obdobným nepolárním rozpouštědlem.
• Stříkačku vysušte.
• Pracujete-li s roztoky solí, doporučujeme skladovat stříkačku s vytáhnutým pístem

Skladování stříkaček

Stříkačky doporučujeme skladovat v originálním obalu. Ten je dokonale chrání a navíc vám poskytuje informaci o typu stříkačky.

Termální desporce

V této sekci jsme pro Vás připravili informace důležité při práci s termální desorpcí. Jedná se o poměrně náročnou analytickou techniku, pře které Vám tyto informace usnadní práci. Pokud zde hledané informace nenajdete, kontaktujte naše specialisty.

Parametry sorbentů

Měření emisí materiálů

Skladování a transport sorpčních trubiček