Chromatografie

Instalace kapilárních GC kolon

Stručný postup při instalaci kapilárních GC kolon

• Vychlaďte všechny vyhřívané zóny GC
• Zkontrolujte čističe plynů a v případě potřeby je vyměňte
• vyčistěte injektor a detektor
• Vyměňte liner v injektoru/detektoru za nový
• Vyměňte důležitá těsnění v injektoru a detektoru
• Vyměňte septum v injektoru
• Nastavte průtok detektorových plynů
• Pečlivě zkontrolujte kolonu, není-li poškozená
• Nasaďte na každém konci kolony matici a ferulku
• Uřízněte 10 centimetrů z každého konce kolony. K řezání křemenných kolon použijte safírový nůž nebo keramickou destičku. K řezání kovových kolon použijte buďto keramickou destičku nebo hranatý pilník. Nástroje pro řezání kolon najdete v našem katalogu.
• Zavěste kapilární kolonu na držáky v termostatu GC, aby nedošlo k jejímu poškození
• Vložte požadovaný konec kolony do injektoru. Správnou délku najdete v návodu pro obsluhu daného GC.
• Kolonu nainstalujte tak, aby se nedotýkala stěn termostatu
• Nastavte průtok kolonou v souladu s parametry uvedenými v testovacím chromatogramu výrobce
• Nastavte splitový poměr, oplach septa a další parametry v souladu s požadavky výrobce GC
• Ujistěte se, že kolonou protéká nosný plyn. Ponořte volný konec kolony do vialky s rozpouštědlem (aceton nebo isopropanol).
• Vložte požadovaný konec kolony do detektoru. Správnou délku najdete v návodu pro obsluhu daného GC.
• Zkontrolujte těsnost kolony tepelně vodivostním detektorem. Nepoužívejte mýdlovou vodu nebo kapalné detektory netěsností, protože může dojít k poškození kolony.
• Nastavte teplotu injektoru a detektoru. Detektor zapněte po jeho stabilizaci. Upozornění - dbejte na to, abyste nepřekročili maximální povolenou teplotu kolony!
• Nyní nastavte správný mrtvý objem (lineární rychlost) nastříknutím metanu nebo jiné sloučeniny, která není kolonou zadržována.
• Zkontrolujte tvar píku, který by měl být symetrický
• Zkondicionujte kolonu při maximální teplotě, až se stabilizuje základní linie detektoru (v testovacím chromatogramu kolony najdete maximální použitou teplotu).
• Nastavte teplotu termostatu a znovu nastříkněte metan nebo jinou, sloučeninu, která není kolonou zadržována. Upravte podmínky pro optimální lineární rychlost.
• Nastříkněte duplicitně testovací směs kolony a zjistěte, v jakém stavu se nachází kolona a celý chromatografický systém
• Nakalibrujte přístroj a nyní můžete nastřikovat vzorky

Poznámka: Je-li kolona nová, musíte provést její kondicionování dříve, než budete nastavovat optimální mrtvý čas.

Kondicionování GC kolon

Kondicionování chromatografických kolon za zvýšené teploty bez průtoku nosného plynu trvale poškodí kolonu. V případě netěsnosti dojde k průniku kyslíku do kolony a při kondicionování za vyšší teploty dojde k jejímu trvalému poškození. Proto před započetím kondicionování:

• zkontrolujte správné nastavení prltoku kolonou
• proveďte kontrolu těstnosti abyste se vyvarovali přítomnosti kyslíku v chromatografickém systému

Kondicionování GC kolony:

• nainstalujte kolonu do injektoru. Kolonu nepřipojujte k detektoru (její konec nechte zajištěný uvnitř termostatu.
• nastavte počáteční teplotu termostatu GC na 40°C
• držte tuto teplotu po dobu 15
• nastavte teplotní gradient na 10°C/min
• nastavte maximální teplotu o 20°C nad maximální hodnotu teplotního programu, se kterým budete pracovat (maximální teplota musí být o 25°C nižší než je maximální povolená teplota GC kolony)*
• ponechejte kolonu při vysoké teplotě přes noc a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru. Je-li kolona před-kondicionovaná, ponechejte ji na maximální teplotě po dobu 2 hodin a dokud se nestabilizuje základní linie detektoru.

^*Poznámka: Kondicionování přes noc není nutné u před-kondicionovaných kolon. Pečlivě si prostudujte návod dodávaný s kolonou, který má přednost před obecnými doporučeními uvedenými výše.

EasyFlash kolony

Chromservis uvedl na trh nové kolony EasyFlash pro vysoce účinnou flash chromatografii. V tomto článku se dozvíte o výhodách flash chromatografie.

Připojení HPLC (TN #539)

Tato technická poznámka ukazuje možné typy spojení mezi sloupem a LC systémem. Špatné připojení může ovlivnit oddělení špiček a je třeba se mu vyhnout. Správné zapojení je uvedeno níže .

Jak pracuje trojitý kvadrupól?

Princip trojnásobného kvadrupólu (TQ) je vysvětlený na systému EVOQ™ firmy Bruker. Klíčové prvky systému jsou zde:

• Axiální intový zdroj
• Aktivní zaostření iontů v Q1
• Iontová dráha bez iontové optiky
• Kolizní cela s geometrií 180°
• Eliptický design
• Detektor umístěný mimo osu Q3

puriFlash

Flash kolony puriFlash^®

Interchim vyvinul novou techniku pro chromatografii - Ultra Performance Flash Purification (UPFP) využívající speciální flash kolonky, které využívají pravidelný nebo nepravidelný silikagel. UPFP umožňuje purifikovat sloučeniny při získání vysoké čistoty výtěžku a s menší spotřebou rozpouštědel.

Preparativní LC

Úlohy preparativních a analytických HPLC systémů se od sebe liší. Zatímco úkolem analytické HPLC je kvalitativní a kvantitativní stanovení definovaných sloučenin ve vzorcích, úkolem preparativní HPLC je separace, vyčištění a izolace cenných produktů ze směsí.

Preparativní chromatografii lze rozdělit do třech základních oblastí:

• Flash chromatografie
• Semi-preparativní separace
• Vsádková preparativní chromatografie (poloprovozní nebo výrobní)
• "True Counter-current chromatography"
• "Simulated moving bed" (SMB)
• Kontinuální chromatografie

Definice rozsahu

Preparativní chromatografii lze kombnovat s Flash chromatografií v jednom systému - purifikační chromatograf. Systém PuriFlash (Advion-Interchim) nabízí různé provozní režimy:

• Preparative mód + Flash mód
• Dva Flash módy
• Dva preparativní módy

Úvod

Aminokyseliny jsou klíčovými stavebními kameny života a hrají klíčovou roli v různých metabolických drahách. Vzhledem k jejich chemické složitosti a dynamickému rozsahu je jejich spolehlivá kvantitativní a kvalitativní analýza v biologických tekutinách a tkáních zásadní pro nutriční informace, identifikaci sloučenin a diagnostiku.

Za tímto účelem byla vyvinuta jednoduchá, elegantní a dosud nejrychlejší metoda pro analýzu aminokyselin. Kit MetAmino^® na bázi LC/GC-MS nabízí komplexní řešení pro 75 metabolitů včetně základních proteinogenních aminokyselin, biogenních aminů a koenzymů s možností dalšího rozšíření analytů.

Vlastnosti

• V zásadě vhodný pro jakékoli matrice (moč, krevní sérum, slzy, mozková tekutina, tkáňové extrakty, půdní extrakty atd.)
• Snadná příprava vzorku
• Derivatizace a analýza vzorků do 20 minut
• Široké portfolio analytů (75) s možností dalšího rozšíření
• Není potřeba žádné zahřívání/zmrazování vzorku
• K dispozici knihovna NIST pro GC/MS
• Lze určit látky s nízkou molekulovou hmotností, které mohou být degradovány v iontovém zdroji (např. GLY, ALA atd.)
• Vhodné pro analýzu obtížně kvantifikovatelných látek, jako jsou polyaminy
• Součástí jsou všechna potřebná činidla, příslušenství, HPLC kolona a návod pro derivatizaci a analýzu s vysokou přesností a citlivostí

Přípustné úpravy metod HPLC

V této technické poznámce jsou uvedeny HPLC kolony Chromservis odpovídající USP metodám a rozsah, v jakém lze různé parametry chromatografického testu upravit bez zásadních změn lékopisných analytických postupů. Jiné než uvedené změny vyžadují revalidaci postupu.