Хроматография

Syringes

Очистка и техническое обслуживание шприцев

Шприцы для хроматографии представляют собой прецизионные устройства для измерения жидкости высочайшего качества. При надлежащем уходе и обращении шприцы год за годом будут обеспечивать непревзойденную эффективность в точном измерении жидкости. Срок службы вашего шприца напрямую зависит от его чистоты!

Некоторые растворители, такие как галогенированные углеводороды, могут воздействовать на высокоустойчивые клеи (цементы), используемые для крепления игл и других наконечников к шприцам Hamilton, и разрушать их, что может привести к замерзанию поршней и закупорке игл.

Очистка корпусов шприцев

Для очистки шприцев Hamilton лучше всего использовать растворители, которые, как известно, эффективны для сольватации образца и предпочтительно не содержат щелочей, фосфатов и моющих средств. Биоразлагаемый, не содержащий фосфатов, органический чистящий концентрат доступен в компании Hamilton (номер заказа 18311).

Тщательно промойте шприц после использования деионизированной водой, ацетоном или другим растворителем, совместимым с образцом. Дайте шприцу высохнуть на воздухе. Избегайте длительного погружения шприца во время очистки.

Шприцы MICROLITER™ (серии 600, 700, 800 и 900)

• Тщательно промойте шприц растворителем, который, как известно, эффективен для сольватации образца. Остаточные растворенные твердые вещества могут привести к замерзанию плунжеров и закупорке игл.
• Чтобы очистить поршень, снимите его с цилиндра шприца и аккуратно протрите безворсовой тканью. Снова вставьте поршень в цилиндр и прокачайте деионизированную воду, ацетон или другой растворитель, совместимый с образцом, через иглу и шприц. Дайте шприцу высохнуть на воздухе. При работе с растворенными твердыми веществами хранение поршня вне шприца снизит вероятность замерзания поршня.

Шприцы GASTIGHT® (серии 1000, 1700 и 1800)

• Тщательно промойте шприц растворителем, который, как известно, эффективен для сольватации образца. Остаточные растворенные твердые вещества могут привести к замерзанию плунжеров и закупорке игл.
• Чтобы очистить поршень, снимите его с цилиндра шприца и аккуратно протрите безворсовой тканью. Вставьте поршень в цилиндр и прокачайте деионизированную воду, ацетон или другой растворитель, совместимый с образцом, через иглу и шприц. Дайте шприцу высохнуть на воздухе. При работе с растворенными твердыми веществами хранение поршня вне шприца снизит вероятность замерзания поршня.

Хранение шприцев

Мы рекомендуем хранить шприцы в оригинальной упаковке. Это помогает защитить шприц и позволяет легко идентифицировать его. Снимите этикетку с описанием продукта с торца коробки и поместите ее на внешнюю сторону упаковки. Это позволит быстро и легко повторно заказать тот же шприц.

Thermal desorption

В этом разделе вы найдете важную информацию в области термической десорбции. Это довольно сложная аналитическая техника, и эта информация может помочь вам в работе с ней. Если вы не нашли необходимой информации, не стесняйтесь обращаться к нашим специалистам .

Параметры сорбента

Мониторинг выбросов материалов

Хранение и транспортировка сорбентных трубок

ChromShell columns and solvents

Существует несколько критических характеристик, которые необходимо учитывать при выборе подходящего органического растворителя для использования в подвижной фазе с колонками ChromShell^®. Вязкость является одним из наиболее важных параметров, поскольку растворители с высокой вязкостью могут создавать противодавление, слишком высокое для используемой системы ВЭЖХ. Другие важные характеристики растворителя включают отсечку УФ-излучения, стоимость и индекс полярности; где растворитель с высоким порогом УФ-излучения приведет к плохой чувствительности при обнаружении УФ/видимого света, а использование дорогостоящих растворителей приведет к плохой лаборатории, которая не может позволить себе покупку новых колонок. Растворители с низким индексом полярности обычно приводят к более быстрому элюированию органических соединений и обычно используются для очистки колонок.

ацетонитрил

возможно, лучший органический растворитель, так как он обеспечивает самое низкое противодавление в системе в водных смесях, а также имеет очень низкое пороговое значение УФ-излучения для лучшей чувствительности обнаружения УФ/видимого света. Хотя производство ацетонитрила начинает расти по мере оздоровления экономики, что снижает стоимость, это по-прежнему остается основным недостатком использования ацетонитрила.

Метанол

является еще одним популярным органическим растворителем, поскольку по силе элюирования он сравним с ацетонитрилом, имеет относительно низкое УФ-поглощение и значительно дешевле ацетонитрила. Основной недостаток метанола, особенно при использовании с колонками для ВЭЖХ с малым размером частиц, заключается в том, что его использование может привести к противодавлению, превышающему многие пределы системы ВЭЖХ.

Ацетон

используется реже, так как обладает высоким УФ-поглощением, но может успешно использоваться, если аналиты поглощают при более высоких длинах волн УФ или если используются другие типы детекторов, такие как МС, поскольку он имеет свойства элюирования, аналогичные ацетонитрилу, но значительно дешевле.

Этиловый спирт

обычно не рекомендуется, так как это приводит к очень высокому противодавлению в водных смесях.

Изо-, н-пропанол

имеют относительно высокую элюирующую способность и чаще всего используются для очистки колонок при низких скоростях потока, поскольку они также приводят к высокому противодавлению.

Тетрагидрофуран

имеет такую же силу элюирования, что и н-пропанол, но используется реже, поскольку намного дороже.

Glassware deactivation

Деактивация стеклянной посуды с помощью DMDCS

Диметилдихлорсилан (ДМДХС) реагирует с активными гидроксильными группами, присутствующими на поверхности стекла, образуя дезактивированный слой. Это обеспечивает инертность стеклянной посуды, используемой для чувствительных соединений.

Процедура

В процессе дезактивации в результате реакции выделяется хлористый водород (HCl). Поэтому мы настоятельно рекомендуем делать эту процедуру в вытяжном шкафу.

• Используйте 5% раствор DMDCS в толуоле. Вы можете приготовить этот раствор, разбавив 20 мл DMDCS 400 мл толуола. Хранить раствор в темном стакане при комнатной температуре.
• Замочите стеклянную посуду в 5% растворе DMDCS на 15–30 минут.
• Дважды промыть стеклянную посуду толуолом.
• Замочите стеклянную посуду в метаноле на 15 минут.
• Промойте стеклянную посуду метанолом.
• Сухая стеклянная посуда с азотом высокой чистоты (без влаги и углеводородов).

Setting linear velocity

Линейная скорость является важным параметром в хроматографии. Он влияет на разрешение хроматографии, поэтому установка мертвого объема является основной частью разработки метода.

Измерение линейной скорости в ГХ

Чтобы установить мертвое время, введите 2 мкл неудерживаемого газообразного вещества, совместимого с детектором. Возьмите газонепроницаемый шприц и нанесите свободное пространство над чистым соединением. Точно отметьте время начала инъекции и пиковое время элюирования.

Примечание. Некоторые соединения могут немного задерживаться на толстопленочной фазе, однако они будут воспроизводимы для аналогичных типов колонок.

Handling chiral columns

Использование и уход за колонкой Lux

Доставка Растворитель

н-гексан/2-пропанол (9:1, об./об.)

Сертификат тестирования

Каждая колонка проходит индивидуальное тестирование перед отправкой. К каждой колонке прилагается сертификат испытаний, показывающий параметры разделения трансстильбеноксида.

Совместимость с подвижной фазой

Колонки Lux можно использовать с нормальной фазой (алкан/спирт), обращенной фазой (водный метанол, водный ацетонитрил или соответствующие смеси буфера/метанола или буфера/ацетонитрила), а также с чистыми полярными органическими растворителями (низкомолекулярные спирты, ацетонитрил или их смеси). смеси).

Переключение растворителя

При переходе с одной подвижной фазы на другую необходимо применять соответствующую процедуру промывки колонки. Для этой промывки необходимо тщательно учитывать смешиваемость различных компонентов подвижной фазы. Для безопасного перевода колонки с гексана на метанол (или ацетонитрил) или с метанола (или ацетонитрила) на гексан используйте 100 % 2-пропанол в качестве переходного растворителя при скорости потока 0,2–0,5 мл/мин. Десяти объемов колонки с 2-пропанолом (т.е. 25 мл для колонки с внутренним диаметром 250 x 4,6 мм или 15 мл для колонки с внутренним диаметром 150 x 4,6 мм) достаточно для полного удаления старой подвижной фазы. Чтобы безопасно перевести колонку с нормальной фазы на обращенную фазу, промойте колонку 100 % 2-пропанолом со скоростью 0,2–0,5 мл/мин в количестве не менее десяти объемов колонки. Кроме того, если добавка буферной соли к подвижной фазе RP нерастворима в 2-пропаноле, перед переключением на буферную подвижную фазу колонку следует ненадолго промыть водой. Мы рекомендуем использовать специальные колонки Lux для работы с обращенной фазой, что позволяет избежать необходимости преобразования колонок, используемых в режиме элюирования с нормальной фазой, в обращенную фазу или наоборот.

Использование модификаторов подвижной фазы

Для основных образцов или кислых хиральных соединений может потребоваться использование соответствующего модификатора подвижной фазы для достижения хирального разрешения и обеспечения правильной формы пиков. Диэтиламин, этаноламин и бутиламин в диапазоне концентраций 0,1–0,5 % можно использовать с основными аналитами, а трифторуксусную или уксусную кислоту (0,1–0,5 %; обычно 0,1–0,2 %) с кислыми аналитами. Допустимы смеси основных и кислотных добавок подвижной фазы (например, ацетат диэтиламина или трифторацетат). Колонки Lux будут давать стабильные результаты при работе с подвижными фазами, содержащими добавки в указанных выше концентрациях. Однако при использовании колонки в сочетании с этими добавками может произойти ограниченное снижение эффективности колонки. Поэтому мы советуем посвящать колонки подвижным фазам, содержащим основные добавки. Ограничения по подвижной фазе Хиральные неподвижные фазы Lux получают путем покрытия силикагеля различными производными полисахаридов. Следовательно, следует избегать любого растворителя, растворяющего производное полисахарида (такого как тетрагидрофуран, ацетон, хлорированные углеводороды, этилацетат, диметилсульфоксид, диметилформамид, N-метилформамид и т. д.), даже в следовых количествах (например, даже в качестве растворителя пробы).

Рабочее противодавление

Скорость потока подвижной фазы должна быть установлена таким образом, чтобы противодавление в колонке оставалось ниже 300 бар (4300 фунтов на кв. дюйм). Это максимальное противодавление не должно превышаться в течение длительных периодов времени.

Рабочие температуры

Со стандартными подвижными фазами (такими как алкан/спирт) колонку можно использовать в диапазоне температур 0–50 °C.

Хранилище столбцов

Хранение колонки в течение более длительного периода времени рекомендуется в смеси н-гексан/2-пропанол (9:1, объем/объем). Колонки, используемые в обращенно-фазовых условиях, должны быть сначала промыты водой (если буферная соль использовалась в качестве подвижной фазы ОФ), а затем метанолом (или метанолом, только если соль не использовалась). Колонку можно хранить в метаноле.

Продление срока службы и восстановление

Phenomenex рекомендует использовать защитные картриджи SecurityGuard™ для продления срока службы вашей колонки, особенно при извлечении образцов из сложных матриц. В идеале образцы должны быть полностью растворены в подвижной фазе или отфильтрованы через шприцевой фильтр с размером пор примерно 0,45 мкм.

Hints and tips

Этот сайт содержит техническую информацию, советы и подсказки для вашего решения, а также рекомендации по выбору подходящих принадлежностей для хроматографии.

• Улучшение входного уплотнения ГХ Agilent
• Динамическое свободное пространство
• Процедура кондиционирования колонки для ГХ
• Установка колонки ГХ
• ГХ вкладыши
• Выбор септ для ГХ
• Процедура деактивации стеклянной посуды
• Как улучшить соединения капиллярных колонок ГХ
• Как увеличить отношение сигнал/шум в системах GC
• Как установить оптимальную линейную скорость
• Как обращаться с хиральными колонками для ВЭЖХ
• Улучшение эффективности разделения ЖХ
• Выбор колонки ЖХ
• Уход за шприцем
• Выбор наконечника шприца
• Термическая десорбция

Dynamic Headspace

Динамическое свободное пространство (DHS) можно использовать для широкого спектра экологических приложений. Загрязняющие вещества могут быть обнаружены в питьевой воде, речной воде и сточных водах. Эти матрицы включают химические вещества различной полярности и летучести, такие как хлорированные углеводороды, ароматические соединения, оксигенаты и т. д. Динамическое свободное пространство также можно использовать для других целей:

• характеристика специй, трав, пищевых продуктов, мыла
• остаточный мономер и другие летучие органические соединения в полимерах
• остаточные растворители в пищевой упаковке
• тестирование продукта с «зеленой этикеткой»
• OVI в фармацевтических продуктах
• следы примесей в активных фармацевтических ингредиентах
• метаболиты в биологических жидкостях (ароматические углеводороды в моче, бензол в крови)

Capillary GC column installation

Краткая процедура установки колонки

• Охладите все нагреваемые зоны ГХ
• Проверьте газоочистители и, если они израсходованы, замените их.
• Очистите инжектор и детектор
• Замените вкладыши инжектора/детектора на новые.
• Замените важные уплотнения инжектора и детектора.
• Замена септы в форсунке.
• Установите расход подпиточного газа и газа детектора.
• Внимательно осмотрите колонку на наличие повреждений или поломок.
• Установите гайку и феррулу на каждый конец колонки.
• Отрежьте по 10 сантиметров с каждого конца столбика. Для разрезания капиллярных колонок из плавленого кварца используйте сапфировую палочку или керамическую пластину. Используйте зазубренный край керамической пластины для надрезов или край острого напильника, чтобы разрезать металлические капиллярные колонки. См. наш каталог инструментов для резки капилляров.
• Установите капиллярную колонку в печь с помощью кронштейна, который защищает колонку от царапин и истирания.
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние во входное отверстие, как указано в руководстве к прибору.
• Установите колонку так, чтобы капилляр не касался стенок печи.
• Установите приблизительную скорость потока в колонке, отрегулировав давление напора до значения, указанного на тестовой хроматограмме, прилагаемой к колонке.
• Установите разделенный вентиль, продувку септы и любые другие применимые входные газы в соответствии со спецификациями прибора.
• Подтвердите поток, погрузив выход колонки во флакон с растворителем (ацетон или изопропиловый спирт).
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние в детектор, как указано в руководстве к прибору.
• Проверьте наличие утечек на входе и выходе с помощью течеискателя по теплопроводности. Не используйте мыло или течеискатели на жидкой основе, иначе колонка может быть повреждена.
• Установите температуры инжектора и детектора. Включите детектор, когда температура уравновесится. Внимание - не превышайте максимальную рабочую температуру фазы!
• Чтобы установить правильное мертвое время (линейную скорость), введите метан или неудерживаемое вещество, совместимое с используемым детектором.
• Проверьте целостность системы, проверив пик мертвого объема. Он не должен хвоста.
• Подготовьте колонку при максимальной рабочей температуре, чтобы стабилизировать базовую линию. (См. тестовую хроматограмму, прилагаемую к колонке, для максимальной температуры.)
• Установите печь на соответствующую температуру и введите метан или соответствующее неудержанное вещество, опять же, чтобы установить правильную линейную скорость.
• Введите дубликат исходной тестовой смеси или вашей конкретной тестовой смеси, чтобы убедиться в правильной установке, работе системы и колонки.
• Откалибруйте прибор и введите образцы.

Примечание. Если колонка новая, необходимо выполнить процедуру кондиционирования перед установкой надлежащего мертвого времени.

Unit Conversions

Диаграмма объема капилляров ВЭЖХ