Хроматография

Допустимые корректировки методов ВЭЖХ

Колонки Chromservis для ВЭЖХ, соответствующие методам USP, а также степень, в которой различные параметры хроматографического теста могут быть скорректированы без фундаментального изменения фармакопейных аналитических процедур, перечислены в данном техническом примечании. Изменения, отличные от указанных, требуют повторной валидации процедуры.

Дозировка пробы при флэш-хроматографии

Жидкие или твердые образцы малого или большого объема — поскольку ваши образцы разнообразны, мы предлагаем несколько вариантов дозирования для каждой колонки, чтобы гарантировать наилучшие результаты.

«Сухая нагрузка»

Доступны одноразовые пластиковые версии динамиков «Сухая нагрузка» или динамики из нержавеющей стали. Их можно использовать повторно, а их преимуществом является большая устойчивость к более высокому давлению.
С помощью колонки из нержавеющей стали «Сухая загрузка» вы можете распылять твердые вещества на препаративную колонку или на колонку для мгновенного испарения, где максимальная устойчивость пластиковой колонки к давлению будет недостаточной.

Дозирующие петли

Наша линейка дозирующих петель предлагает объемы от 100 мкл до 50 мл, поэтому мы можем удовлетворить все ваши потребности.

Автосамплер

Автоматизируйте дозирование проб с помощью нашего автосамплера и увеличьте производительность в десять раз. ^PuriFlash® AS-1 позволяет дозировать образцы объемом от 50 мкл до 500 мл с автоматической очисткой использованных пробирок между каждой инъекцией.

Дозирование проб осуществляется с помощью программного обеспечения InterSoft . Автосамплер может быть оснащен 6-ходовым или 10-ходовым электрическим клапаном.

Платформа автосамплера имеет возможность использования подставки для пробирок или бутылей объемом до 250 мл или использования индивидуальных подставок.

Дозирующий насос

Если у вас есть большие объемы проб, которые необходимо распределить во флэш-колонке или препаративной колонке, просто воспользуйтесь нашим насосом, а затем запустите метод. Это так просто!

Стационарная фаза для ВЭЖХ

ASTRA - CHROMSERVIS

ARION - CHROMSERVIS

На нашем веб-сайте вы также найдете инструкции по уходу за колонками (U)ВЭЖХ Arion.

CHROMSHELL - CHROMSERVIS

КИНЕТЕКС - ФЕНОМЕНЕКС

*Колонки обладают стабильностью в диапазоне pH от 1,5 до 10 в изократических условиях. В градиентных элюциях их стабильность находится в диапазоне рН от 1,5 до 8,5.

Колонки Kinetex 2,6 мкм с внутренним диаметром 2,1 мм стабильны до давления 1000 бар, в противном случае — до 600 бар.

Попробуйте колонки ChromShell, которыми вы можете заменить колонки Kinetex.

ЛУНА – ФЕНОМЕНЕКС

БЛИЗНЕЦЫ – ФЕНОМЕН

СИНЕРГИЯ – ФЕНОМЕН

ОНИКС – ФЕНОМЕНЕКС

ЮПИТЕР – ФЕНОМЕН

ГрейсСмарт - ГРАЦИЯ

Alltech ^® Prevail - ГРАЦИЯ

Капиллярные/наноколонки для ЖХ ProteCol - SGE

HOW TO CORRECTLY CRIMP VIALS

Обжимные флаконы являются отличными контейнерами для образцов для автоматических дозаторов газовых и жидкостных хроматографов, а также для хранения образцов или калибровочных растворов. Техника их закрытия очень важна для правильной герметичности. Из-за утечки, вызванной неправильной герметизацией, может произойти испарение растворителя или потеря аналитов.
Правильно закрытый флакон можно узнать по тому, что его крышка после закрытия вращается с трудом, а перегородка прямая.
Флакон, закрывающийся с чрезмерным усилием, можно узнать по тому, что его крышка обычно вообще не поворачивается и, кроме того, он имеет загнутую перегородку (внутрь). Если перегородка будет проколота иглой микрошприца, перегородка окажется под сильным напряжением и, таким образом, герметичность флакона будет нарушена.
Флакон, не имеющий правильно закрытой крышки из-за малой мощности обжимных клещей, проявляется легким вращением крышки и, в некоторых случаях, отстегиванием алюминиевого материала вокруг нижнего края горлышка флакона.
Вы можете установить правильное усилие закрывающих клещей.
В некоторых случаях регулировка силы осуществляется поворотом шестигранного ключа внутри губок. Плоскогубцы также имеют стопорный винт, который устанавливает безопасное расстояние, чтобы предотвратить их использование.
силы, которые слишком велики и, таким образом, приводят к утечке или даже механическому повреждению флакона.

Данные масс-хроматограммы

Гигант. 1: Масс-хроматограмма внутренних стандартов SD1 и SD2. Разделение 5 нмоль аминокислот с помощью LC-MS Metamino®

Гигант. 2: Масс-хроматограмма реального образца: Разделение аминокислот в формуле пива Budvar 12˚ (25 мкл образца было нанесено на колонку). Высокая эффективность и высокое разрешение нашей колонки способствуют хорошему разделению пиков. Образец протестирован с помощью LC-MS Metamino®

Гигант. 3: Масс-хроматограмма реального образца: разделение аминокислот, присутствующих в сыворотке крови (25 мкл осажденной сыворотки наносили на колонку). Высокая эффективность и высокое разрешение нашей колонки способствуют хорошему разделению пиков. Образец протестирован с помощью LC-MS Metamino®

Базовые приготовления

После извлечения содержимого из матрицы можно приступить к подготовке проб для анализа ЖХ-МС/ГХ-МС.

Этот протокол лишь кратко описывает процедуру подготовки проб. Подробную процедуру можно найти в руководстве пользователя Metamino^®.

Анализ ЖХ-МС происходит следующим образом:

1. Отнесите пипеткой 100 мкл извлеченного содержимого (сыворотки, плазмы и т. д.) и добавьте 100 мкл среды осаждения. Центрифуга в течение 30–60 секунд при 1500 г (6000 об/мин).
2. Отнесите пипеткой 25 мкл осажденного образца и добавьте 10 мкл раствора внутреннего стандарта в каждый флакон для подготовки проб.
3. Внесите пипеткой 25 мкл раствора катализатора в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд.
4. Внесите пипеткой 10 мкл раствора реагента в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд. Разрешить дериватизации продолжаться в течение по крайней мере 2-3 минут.
5. Активируйте и уравновесьте сорбент в микроспиновом фильтре добавлением:
   1. 200 мкл среды активации MSPE, затем центрифугируйте в течение 30–60 секунд при 1500 g (6000 об/мин).
   2. 200 мкл уравновешивающей сорбентной среды MSPE, затем центрифугируйте в течение 30–60 секунд при 1500 g (6000 об/мин).
6. Вылейте элюат через мембрану.
7. Разбавьте реакционную смесь дериватизации 400 мкл среды для разбавления и промывки и перемешайте на вортексе в течение 5-10 секунд.
8. Разбавленную реакционную смесь (обычно 450-500 мкл) наносят на увлажненный сорбент микроспинового фильтра и оставляют на 1-2 минуты. Центрифуга в течение 30–60 секунд при 1500 г (6000 об/мин).
9. Вылейте элюат через мембрану.
10. Сорбент промывают на микроспиновом фильтре 200 мкл разбавленной и промывной среды и центрифугируют от 30 до 60 секунд при 1500 g (6000 об/мин).
11. Поместите микроспиновый фильтр в новый флакон для центрифуги, добавьте 200 мкл элюирующей среды и центрифугируйте в течение 30–60 секунд при 1500 г (6000 об/мин).
12. Перенесите элюат во флакон автосамплера. Образец готов к анализу ЖХ-МС.

ГХ-МС анализ происходит следующим образом:

1. Внесите пипеткой 25 мкл целевого образца и 10 мкл раствора внутреннего стандарта в каждую стеклянную реакционную пробирку.
2. Внесите пипеткой по 20 мкл восстановителя в каждую стеклянную реакционную пробирку и кратковременно перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд. Дайте постоять 1-2 минуты.
3. Внесите пипеткой по 25 мкл исходной среды в каждую реакционную стеклянную пробирку и добавьте 50 мкл раствора реагента (дериватизации) в каждую реакционную стеклянную пробирку и встряхивайте в течение 5–10 секунд.
4. Внесите пипеткой 25 мкл раствора катализатора в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд.
5. Внесите пипеткой 25 мкл раствора катализатора в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд. Дайте постоять 1-2 минуты. Эмульсия постепенно разделяется на два слоя.
6. Внесите пипеткой 50 мкл экстракционной среды в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд.
7. Внесите пипеткой 25 мкл кислой среды в каждый флакон для подготовки проб и перемешайте на вортексе в течение 5–10 секунд. Затем центрифугируйте в течение 30–60 секунд при 1500 g (6000 об/мин).
8. Перенесите органический (верхний) слой (50–100 мкл) во флакон автосамплера с вкладышем. Образец готовят для анализа ГХ-МС.

Содержимое набора

Набор MetAmino ^® содержит все реагенты, среды и химикаты. Содержимое стартового набора указано в таблицах ниже:

Содержимое набора ЖХ-МС на 100 образцов:

Состав набора ГХ-МС на 100 образцов:

Описание

Наши наборы MetAmino ^® LC-MS и GC-MS обеспечивают быструю, надежную, воспроизводимую и точную процедуру анализа аминокислот, которая включает как подготовку проб, так и хроматографическое разделение.

Метод ЖХ-МС основан на твердофазной микроэкстракции с использованием специальных микроспиновых фильтров ( МСПЭ ) с недавно разработанным сорбентом и встроенной мембраной 0,22 мкм, метод ГХ-МС использует жидкостно-жидкостную микроэкстракцию ( ЖЖМЭ ). для подготовки. После этой предварительной обработки образец анализируют с помощью ЖХ-МС (ГХ-МС). В общей сложности подготовка образца для ЖХ-МС занимает около 8 минут, а анализ образца — 12 минут, поэтому все время эксперимента составляет всего 20 минут. Общее время эксперимента ГХ-МС еще короче – около 17 минут.

Этот уникальный набор отвечает всем лабораторным требованиям и предназначен для всех конечных пользователей, которым нужен простой аналитический метод и высокая эффективность разделения.

Обзор сорбентов МСПЭ

Сорбенты для метода МСФЭ выбираются с учетом максимально широкой области применения. MSPE SpeExtra C18 представляет собой гидрофобный тип октадецилсиликагеля со специальным концевым покрытием с очень широким применением. Он подходит для широкого спектра аналитов, показывая худшее удерживание полярных соединений. MSPE SpeExtra C18-P представляет собой полярно модифицированный мономерный октадецилсиликагель. Он предлагает различные типы взаимодействий: диполь-дипольное, π-π и гидрофобное. Поэтому он подходит для ароматических и полярных соединений. Полимерный сорбент MSPE SpeExtra HLB с высокой удельной поверхностью и специальным торцевым покрытием. Он имеет гидрофильную и липофильную модификации, обеспечивающие универсальное применение и более высокую емкость, чем силикагель С18. MSPE SpeExtra WAX — это полимерный сорбент на основе ПС/ДВБ со специальным блокированием концевых групп и высокоспецифичной поверхностью, который получают путем сополимеризации стирола и дивинилбензола, создавая слабые анионные взаимодействия.

Очистка и тестирование конопли

Конопля содержит сотни каннабиноидов, причем каннабидиол (КБД) является наиболее распространенным в растении, а Δ 9-тетрагидроканнабинол (ТГК) является активным ингредиентом, вызывающим психотропные эффекты. Однако есть гораздо больше соединений, которые производятся растением каннабис и которые были изучены на предмет их лечебных эффектов. Этот предел часто требует обработки дистиллированного экстракта каннабиса (удаление ТГК из исходного экстракта) и может быть достигнут с помощью препаративной хроматографии, такой как система puriFlashR XL-Cannabis. ВЭЖХ-анализ исходного материала (дистиллят), фракций, собранных в процессе очистки, и конечного продукта можно проводить с помощью аналитической системы Advion AVANT HPLC-UV. В этом пионе представлены как методы очистки, так и аналитические методы, которые представляют собой комплексное решение для удаления ТГК в конопляной промышленности.

• Устройство puriFlah ^® L-Cannabis с производительностью до 4,3 кг/день (внутренний диаметр колонн до 15 см)
• PuriFlah ^® XL-инструмент для каннабиса производительностью до 12,2 кг/день (внутренний диаметр колонн до 20 см в диаметре)
• Считыватель планшетов Plate Express TLC