Pri používaní HPLC kolón ChromShell® znamená vziať do úvahy niekoľko dôležitých charakteristík, ktoré majú organické rozpúšťadlá používané v mobilnej fáze. Viskozita je najdôležitejším parametrom, pretože rozpúšťadlá s vysokou viskozitou sú príčinou zvýšenia protitlaku v HPLC systéme. Ďalšími dôležitými parametrami sú "UV cutoff", index polarity a cena. Rozpúšťadlá s vysokým parametrom "UV cutoff" zhoršujú citlivosť v UV/VIS detektoroch a rozpúšťadlá s nízkou polaritou spôsobujú rýchlejšiu elúciu organických zlúčenín a sú často používané na čistenie alebo regeneráciu kolón.
je pravdepodobne najlepšie organické rozpúšťadlo používané v zmesi s vodou, pretože poskytuje najnižší protitlak v HPLC systémoch. Súčasne má veľmi nízky "UV cutoff" a teda výbornú citlivosť v UV / Vis detektoroch. Najväčšou nevýhodou je jeho cena, ktorá sa v poslednej dobe výrazne zvýšila.
je ďalšie veľmi obľúbené rozpúšťadlo, ktoré má podobnú elučnú silu ako acetonitril, má relatívne nízku absorbanciu v UV oblasti a je oveľa lacnejšie ako acetonitril. Hlavnou nevýhodou metanolu pri jeho používaní s HPLC kolónami s malou veľkosťou častíc je tvorba vyššieho protitlaku, ktorý môže presiahnuť limit HPLC prístroja.
je menej používané rozpúšťadlo vďaka vysokej absorpcii v UV oblasti. Niekedy sa využíva pri analýzach zlúčenín absorbujúcich pri vyšších vlnových dĺžkach alebo v spojení s inými typmi detektorov, napr. MS.
nie je bežne odporúčaný pre používanie s HPLC. V zmesi s vodou spôsobuje vysoký protitlak.
majú relatívne silnú elučnú silu a sú väčšinou používajú na čistenie kolón pri nízkych prietokoch, pretože tiež generujú vysoký protitlak.
má podobnú elučnú silu ako n-propanol, ale vďaka vyššej cene je používaný menej často.
Tabuľka približných protitlakov zmesi rozpúšťadla s vodou v pomere 50:50 na kolóne ChromShell 150 x 4.6 mm pri prietoku 1.2 ml/min a 20 ° C
Rozpúšťadlo | Viskozita (cP) | Protitlak (bar) | Index polarity |
---|---|---|---|
Acetonitril | 0.37 | 200 | 5.8 |
Metanol | 0.60 | 390 | 5.1 |
Acetón | 0.32 | 325 | 5.1 |
Etanol | 1.20 | 630 | 5.2 |
N-propanol | 2.27 | 650 | 3.9 |
Tetrahydrofurán | 0.55 | 430 | 4.0 |
Viac o HPLC rozpúšťadlách nájdete tu.