Repromer K HPLC колонка, 9 µm, 300 x 8 mm

Компания «Хромсервис» запустила новую линейку колонок для ВЭЖХ, предназначенных для разделения сахаров, сахарных спиртов и органических кислот. На рынке представлено множество колонок для анализа сахаридов с различной селективностью и принципом разделения. Существует четыре основных метода разделения сахаров, сахарных спиртов и органических кислот.

Важная информация

Различия между этими 4 типами колонок в основном заключаются в порядке элюирования отдельных пиков, а также в режимах разделения и элементах, используемых при разделении. Существуют два полезных правила:

• Колонки Reprosil Carbohydrate, Repromer RCX и Reprosil-Pur C18-AQ – первыми элюирующими соединениями являются небольшие молекулы сахара, а затем высшие полисахариды.
• Полимерные колонки Reprogel a Repromer (H, Ca, K, Na, Pb) – первыми элюирующими соединениями являются напротив полисахариды.

На колонках Repromer улучшается разделение моносахаридов от Na к Ca и к Pb форме. Для олигосахаридов действует прямо противоположное правило – разделение улучшается на колонках в следующем порядке: Pb, Ca и Na.

Режимы разделения:

1. Разделение на фазах на основе силикагеля с аминогруппой (USP L8) работает на колонке Reprosil Carbohydrate при температуре от 20 до 40 °C. Типичной подвижной фазой является ацетонитрил/вода (примерно 70/30). Стабильность колонки находится в диапазоне рН 3 и 7.
2. Разделение полимерных фаз с помощью ионообменного сорбента работает на колонках Repromer (ранее ReproGel), в которых используется сорбент, полностью сульфированный сополимер стирола и дивинилбензола, сшитый 8% сильным катионообменником. Вот несколько ионных форм, подходящих для разделения сахаров, сахарных спиртов и органических кислот:

• Репромер H (USP L17) сахара, сахарные спирты, органические кислоты;
• Repromer Ca (USP L19) дисахариды, моносахариды и сахарные спирты;
• Репромер Pb (USP L34) моносахариды, образцы молока с лактозой и лактулозой;
• моно- и олигосахариды репромера Na (USP L58);
• Репромер К.

Типичной подвижной фазой является вода при более высоких температурах (от 60 до 90 °C) для всех фаз или 5 мМ серная кислота (H2SO4) для колонки Repromer H при более низких температурах. Детектирование – РИ или УФ (192–200 нм), давление ниже 100 бар.

3. Разделение на полимерных анионообменных стирол-дивинилбензольных фазах при более высоких значениях pH (USP L47) в изократическом или градиентном режиме с детектированием PAD (импульсный амперометрический детектор), CDD (детектор проводимости) или RI.

• Репромер 10-RCX для низших сахаров и сахарных спиртов до DP8;
• Repromer 30 RCX для высших сахаров до DP15.

Типичная подвижная фаза представляет собой 10–100 мМ гидроксида натрия (NaOH) или ацетата натрия при градиентном разделении при давлении ниже 100 бар.

4. Разделение фаз на основе силикагеля с группой C18 (USP L1) проводится на колонке Reprosil-Pur C18-AQ при температуре от 20 до 40 °C. Типичной подвижной фазой является вода для сахаров и 0,2М тригидрофосфорная кислота (H3PO4) для органических кислот, давление до 400 бар.